[发明专利]ACE抑制五肽

权利要求书

1.ACE抑制五肽，氨基酸序列为Gly-Ser-Val-Gly-Tyr。

2.根据权利要求1所述的ACE抑制五肽，其特征在于，包括由氨基酸璇光度不同而定义为L型氨基酸或D型氨基酸的不同构型的五肽。

3.根据权利要求1所述的ACE抑制五肽，其特征在于，源自鱼鳞胶原蛋白。

4.权利要求1所述的ACE抑制五肽的制备方法，包括原料预处理、水溶性胶原蛋白提取及酶解，以及活性五肽分离的步骤，其特征在于，所述的活性五肽分离包括超滤、凝胶过滤及C₁₈高效液相色谱分离的步骤，分离过程中跟踪检测分离组分的ACE抑制活性，收集具有ACE活性的组分进行下一步分离。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的活性五肽分离包括如下步骤：

(1)酶解产物超滤后，取分子量小于3000道尔顿的组分，采用Sephadex G-25分离，流动相为30%的甲醇溶液，柱温为室温，检测波长为280nm；

跟踪检测分离组分的ACE抑制活性，按时间收集具有ACE抑制活性的组分V；

(2)步骤(1)所得的组分Ⅴ经离子交换层析进一步分离，跟踪检测分离组分的ACE抑制活性，收集具有ACE抑制活性的组分Vb，冷冻干燥备用；

(3)步骤(2)所得的组分Vb经PR-HPLC纯化，跟踪检测分离组分的ACE抑制活性，收集具有ACE抑制活性的组分Vba，冷冻干燥。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中，组分Ⅴ经离子交换层析进一步分离，获得3个组分，按时间收集，中间组分具有ACE抑制活性，为组分Vb。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中PR-HPLC条件包括：

Hypersil C₁₈柱；检测波长215nm，室温，进样体积20μl；

梯度洗脱：0～60min：流动相A，100～50％线性降低；

流动相B，0～50％线性升高；

60～80min：流动相A，0％；流动相B，100％；

其中，流动相A为：按照体积百分比，含0.1%TFA水溶液，用前超声脱气；

流动相B为：按照体积百分比，含0.1%TFA的乙腈，用前超声脱气。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的原料预处理包括如下步骤：将干鱼鳞置于10～20倍重量的清水中浸泡2～4小时，滤网脱除游离水分后，再用10～12倍重量的质量浓度为0.1～1.0%盐酸浸泡1～6小时，然后以质量浓度为0.1～0.5%氢氧化钠溶液中和至中性，水洗脱除盐分，滤网沥干，作为水溶性胶原蛋白提取用原料鱼鳞。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的水溶性胶原蛋白提取及酶解是将经预处理的原料鱼鳞与去离子水按照质量比1:2～10装入蒸煮釜，60～120℃加热2～8小时，收集溶液部分为水溶性胶原蛋白；然后以胃蛋白酶酶解24小时。

10.预防和/或治疗高血压组合物，含有权利要求1所述的ACE抑制五肽。