[发明专利]地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法

权利要求书

1.一种地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)水体样品的预处理：将水体样品过滤后进行固相萃取；

(2)采用超高效液相色谱-质谱串联方法对水体样品的萃取液进行检测；

(3)绘制标准曲线，并以外标法进行定量测定，通过换算得到水体样品中痕量糖皮质激素及其衍生物的浓度。

2.根据权利要求1所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：步骤(2)中所述超高效液相色谱-质谱串联方法中的仪器和色谱条件为：

ACQUITY^TM超高液相色谱仪、Agilent Zorbax SB-C18柱(100mm×3mm,1.8μm)和Micromass-Quattro Premier XE质谱仪，使用MassLynxV4.1软件，柱温：40℃；样品温度：4℃；进样体积：3μL；流动相A：甲醇，流动相B：含0.1％(体积分数)乙酸的水溶液，洗脱程序如下：0～6min，A：35％→45％；6～12min，A：45％→80％；12～15min，A：80％→95％；15～15.1min，A：95％→35％。

3.根据权利要求2所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：步骤(2)中所述超高效液相色谱-质谱串联方法中的质谱条件为：

离子源为电喷雾电离采用ESI(-)模式，毛细管电压：3.00kV，射频透镜1电压：27.0V，射频透镜2电压：0.0V，离子源温度：99℃，脱溶剂温度：450℃，脱溶剂气流量：600L/h，碰撞梯度：1.9，采用多选择反应监测转换模式MRM。

4.根据权利要求3所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：所述水体样品的预处理包括如下步骤：

采集需要检测的水体样品，置于棕色玻璃瓶中运回实验室，为避免固相萃取柱的堵塞，1.5L水体样品首先经过1.2μm孔径的Whatman公司GF/C玻璃纤维滤纸过滤，接着以3～5mL/min的流速通过事先用6mL乙酸乙酯、6mL乙腈和6mL超纯水活化的HLB固相萃取柱，水体样品全部通过固相萃取柱后，用12mL超纯水淋洗固相萃取柱，并用氮气吹干除尽萃取柱内的水分，再用6mL体积比为1:1的乙酸乙酯/乙腈洗脱HLB固相萃取柱，收集洗脱液利用微弱氮气吹干，用100μL甲醇重新溶解定容待测，所有萃取富集过程在6h内完成。

5.根据权利要求4所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：所述糖皮质激素及其衍生物为泼尼松、可的松、氢化可的松、泼尼松龙、氟米松、地塞米松、曲安西龙、醋酸氟氢可的松、曲安奈德、甲泼尼龙、倍氯米松、醋酸可的松、醋酸氢化可的松、氟米龙、醋酸地塞米松、布地奈德和丙酸氯倍他索。

6.根据权利要求5所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：所述质谱条件中的质谱采集参数如表1所示：

表1  目标糖皮质激素及其衍生物的质谱采集参数¹⁾

1)^a表示该碎片离子为定量离子

7.根据权利要求6所述的地表水体中若干种痕量糖皮质激素及其衍生物的检测方法，其特征在于：所述方法还包括：使用糖皮质激素的同位素标样cortisol-d₄作为过程内标用以校正实际样品在前处理和检测过程中的损失。