[发明专利]工布乌头在缓解果蝇肠道炎症损伤中的应用

说明书

本发明是工布乌头提取物在缓解果蝇肠道炎症损伤中的应用。采用水提法得到工布乌头提取物，对工布乌头提取物进行果蝇肠道炎症损伤模型修复实验，结果发现工布乌头提取物具有良好的抗炎活性，可用于制备抗炎药物,尤其是抗肠道炎症损伤的药物。

技术领域

本发明涉及工布乌头提取物在缓解果蝇肠道炎症损伤方面的应用，涉及果蝇天然免疫技术领域。

背景技术

正常情况下，肠粘膜屏障中的正常菌群与宿主之间具有一定的平衡。不良的外界环境，感染等条件下均会引起肠道内稳态失调，进而诱导机体产生全身或局部炎症反应。病原体通过肠道进入机体后，诱导肠道表皮细胞激活一系列免疫应答反应，最终通过产生抗菌肽和活性氧将病原体杀死。在果蝇中，一个肠道干细胞(Intestinal stem cell,ISC)进行不对称分裂通常可产生两个细胞，其中一个细胞保持干细胞特性，另一个为短暂不分裂的成肠细胞(Enteroblast,EB)，成肠细胞可继续分化为吸收型的肠上皮细胞(Enterocyte,EC)或者分泌型的内分泌细胞(Enteroendocrine cell,EE)。上述细胞的共同作用可实现肠道组织的维持和更新。与哺乳动物肠道相比，果蝇的肠道结构及细胞组成相对简单，而且调节肠道功能的相关信号途径都与哺乳动物相似。综上，研究果蝇肠道免疫调节机制及肠道干细胞分化机制对揭示人类肠道相关疾病的发病机制具有重要的指导意义。

工布乌头(Aconitum kongboense Lauener)分布于中国西藏，四川西部等地，是常用藏药。工布乌头有毒，具有祛风除湿，止痛等功效，用于治疗湿关节疼痛，跌打损伤，毒虫咬伤等病症。然而，目前尚无对工布乌头提取物用于缓解肠道炎症损伤的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于揭示出工布乌头提取物可应用于缓解肠道炎症损伤。

上述目的是通过以下方案予以实现的：

首先给果蝇喂食有毒试剂(SDS和DSS)来建立果蝇肠道炎症损伤模型，将工布乌头提取物进行果蝇生存率、肠道上皮细胞数量及免疫染色、肠道形态学观察等实验，结果发现工布乌头提取物具有较好的抗炎活性，可用于制备抗炎药物，尤其是治疗肠道炎症的药物。

附图说明

图1为工布乌头提取物对SDS和DSS处理后果蝇生存率的影响；

图2为工布乌头提取物对SDS处理后果蝇肠道干细胞和成肠细胞数量的影响；

图3为工布乌头提取物对SDS处理后果蝇肠道细胞免疫染色结果的影响；

图4为工布乌头提取物对SDS处理后果蝇肠道形态的影响；

具体实施方式

下面结合实例对本发明作进一步说明：

实验动物：野生型W¹¹¹⁸品系黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)为实验室保存，esgGal4 UAS-GFP由北京大学袭荣文教授提供。果蝇培养温度为25℃、相对湿度60％。

果蝇培养基的配制：对照组培养基配方为玉米粉14.2g、琼脂1.1g、酵母粉3.3g、大豆粉1.9g、白糖17g、丙酸0.94mL、去离子水200mL。实验组中加入与对照组去离子水等体积的工布乌头提取液，实验组中工布乌头提取物的浓度为1％。

本实施例涉及的各实验试剂均为市售分析纯：SDS和DSS等。

实施例1工布乌头水提取液的制备

称取工布乌头粉末10g，加入300mL去离子水隔夜浸泡12h，中火熬制3h，过滤，滤渣后加入200mL去离子水用同样的方法提取1次，合并2次滤液浓缩至50mL，即得到质量浓度为200mg/mL(20％)的中草药水提取液。4℃密封储存备用。