[发明专利]一种注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法及应用

权利要求书

1.一种注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，包含下述步骤：

(1)对具有成骨活性的细胞体外培养后，进行成骨诱导分化，使所述具有成骨活性的细胞分泌出细胞外基质，然后进行脱细胞处理，得到成骨诱导的细胞外基质；

(2)对所述成骨诱导的细胞外基质进行碎片化处理，得到成骨诱导的细胞外基质颗粒；

(3)将所述成骨诱导的细胞外基质颗粒与凝胶基质混合，制备得到所述注射型组织工程骨凝胶载体；

所述凝胶基质为胶原、纤维蛋白凝胶或藻酸钙凝胶；

将所述成骨诱导的细胞外基质颗粒与凝胶基质混合时，每1毫升凝胶基质中混合0.01～1mg成骨诱导的细胞外基质颗粒。

2.根据权利要求1所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述具有成骨活性的细胞为诱导多能干细胞、间充质干细胞或成骨细胞。

3.根据权利要求2所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述具有成骨活性的细胞为间充质干细胞。

4.根据权利要求3所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述成骨诱导分化的时间为2～4周。

5.根据权利要求1所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述脱细胞处理的方法为超声波法、冻干法或化学法。

6.根据权利要求1所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述碎片化处理时使用深低温粉碎法。

7.根据权利要求6所述的注射型组织工程骨凝胶载体的制备方法，其特征在于，所述碎片化处理时将成骨诱导的细胞外基质碎片化至体积为0.01～0.1mm³的颗粒。