[发明专利]HHrpEac蛋白及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了HHrpEac蛋白及其编码基因和应用。本发明提供的HHrpEac蛋白，自上游至下游依次包括如下区段：HrpN1区段、HrpW区段、Hpa1区段、HpaGXooc区段、HrpN2区段和HrpzPSS区段；HrpN1区段由序列1自N末端第1‑29位氨基酸残基组成；HrpW区段由序列1自N末端第35‑83位氨基酸残基组成；Hpa1区段由序列1自N末端第87‑114位氨基酸残基组成；HpaGXooc区段由序列1自N末端第124‑153位氨基酸残基组成；HrpN2区段由序列1自N末端第158‑197位氨基酸残基组成；HrpzPSS区段由序列1自N末端第346‑388位氨基酸残基组成。本发明提供的蛋白质，在低浓度(5μg/ml)下可以明显促进植物的生长，最终大大提高植物产量。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，涉及HHrpEac蛋白及其编码基因和应用，具体涉及HHrpEac蛋白及其编码基因在促进植物生长中的应用。

背景技术

Harpin是一种富含甘氨酸的热稳定性蛋白质，是通过革兰氏阴性植物致病细菌中III型分泌系统分泌的。Harpin可以在非寄主植物和抗病植物上激发过敏性反应(hypersensitive response，HR)，在感病寄主上具有致病性(pathogenicity)。当在非寄主植物上使用Harpin时，可以提高植物的抗病抗虫性，同时它还可以促进植物的生长，从而提高作物的产量。Harpin主要通过受体及传导，激发宿主植物细胞内的信号物质，同时激发植物自身抗病、抗虫、抗不良环境的防卫系统和生长发育系统的表达和活力，促进生长发育，从而极大增强作物对病毒、细菌、真菌的防御能力。Harpin属于新型、安全、稳定和高效的生物农药和生长促进剂。

如需要大量生产Harpin蛋白，在大肠杆菌中重组表达是非常有效的方法，但是这些蛋白有很多在大肠杆菌中是以包涵体的形式存在。如来源于Pectobacteriumcarotovorum的HrpEcc在大肠杆菌中表达主要以包涵体的形式存在，因此在大肠杆菌中可溶性大量表达Harpin将是非常有用的技术。

目前Harpin蛋白的使用浓度为15-100μg/ml,只用在这种高浓度时才能有效的提高农作物的产量。但是当使用较高浓度时Harpin时，将会明显提高农作物的成本，因此限制其使用。因此需要开发出更高效的harpin蛋白，降低其使用成本，使其在农业生产中广泛应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是获得高生物活性Harpin蛋白，降低其在农业生产中使用成本。为解决上述技术问题，本发明提供了HHrpEac蛋白及其编码基因和应用。

本发明提供了一种蛋白质，命名为HHrpEac蛋白，自上游至下游依次包括如下区段：HrpN1区段、HrpW区段、Hpa1区段、HpaGXooc区段、HrpN2区段和HrpzPSS区段；所述HrpN1区段由序列表的序列1自N末端第1-29位氨基酸残基组成；所述HrpW区段由序列表的序列1自N末端第35-83位氨基酸残基组成；所述Hpa1区段由序列表的序列1自N末端第87-114位氨基酸残基组成；所述HpaGXooc区段由序列表的序列1自N末端第124-153位氨基酸残基组成；所述HrpN2区段由序列表的序列1自N末端第158-197位氨基酸残基组成；所述HrpzPSS区段由序列表的序列1自N末端第346-388位氨基酸残基组成。

所述“1个以上拷贝的HrpN2区段”具体可为4个拷贝的HrpN2区段。

所述HHrpEac蛋白具体可为如下(Ⅰ)或(Ⅱ)或(Ⅲ)或(Ⅳ)：

(Ⅰ)序列表的序列1所示的蛋白质；

(Ⅱ)在序列表的序列1所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；

(Ⅲ)序列表的序列3所示的蛋白质。

(Ⅳ)将(Ⅰ)或(Ⅱ)或(Ⅲ)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有促进植物生长活性的蛋白质。