[发明专利]一种含海藻基质的复合生防菌剂及制备方法和用途

权利要求书

1.一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，该生防菌剂包括海藻渣、保藏编号为CGMCC No. 9256的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）2-1、保藏编号为CGMCC No.9257的解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）9-2，其中海藻渣与芽孢杆菌发酵液的用量比例以w/v计为2~8:1，枯草芽孢杆菌2-1与解淀粉芽孢杆菌9-2的用量比例为1:1~5；

该生防菌剂的制备过程包括以下步骤：

1）接种发酵

a、在无菌操作条件下，用移液枪将甘油管保存的生防菌株2-1和生防菌株9-2各0.1m L分别接种到装有第一培养基的玻璃平皿上，37℃培养18h进行菌种活化；

b、将活化后的菌株分别接种到装有第二培养基的三角培养瓶中，发酵得种子液，其中接种量为1~5%，发酵时间为16~24h，转速为120~200r/min，发酵温度为37℃；

c、将种子液分别移入装第三培养基的发酵罐中，接种量为1~3%，发酵时间为22~26h，转速为120~200r/min，温度为37℃，通气量200L/h；

2）含海藻基质的生防菌剂制备

将发酵成熟的菌液与海藻渣混合均匀，采用湿法造粒技术制成颗粒剂；

3）干燥；

4）包装备用；

其中，所述第一培养基配方为：蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L，pH值为7.5；

所述第二培养基配方为：蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，氯化钠10g/L，pH值为7.5；

所述第三培养基配方为：酵母膏5~10g/L、可溶性淀粉8~16g/L、葡萄糖

4~8g/L、黄豆饼粉8~16g/L、牛肉膏6~12g/L、玉米粉8~16 g/L，PH值为6.5~8.0。

2.根据权利要求1所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，海藻渣与芽孢杆菌发酵液的用量比例以w/v计为4~5:1，枯草芽孢杆菌2-1与解淀粉芽孢杆菌9-2的用量比例为1:2~4。

3.根据权利要求1所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，芽孢杆菌发酵液中每株菌的活菌数均≥1×10⁸ cfu/mL。

4.根据权利要求1所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，菌剂基质载体为灭菌的新鲜或腐熟的海藻渣，所含成分及含量为：粗蛋白15~25%、粗纤维45~55%、灰分2~4%、余量为水分。

5.根据权利要求1所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，海藻基质为褐藻、蓝藻、衣藻、绿藻中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂，其特征在于，干燥的工艺条件为：用干燥设备在温度为40~50℃条件下干燥至颗粒含水量为6~18%。

7.根据权利要求1~6任一项所述的一种含海藻基质的复合生防菌剂的用途，其特征在于，该菌剂对中药材丹参腐皮镰刀菌、天南星根腐病菌、北沙参立枯菌、桔梗枯萎病菌以及蔬菜作物黄瓜尖孢镰刀菌、黄瓜立枯丝核菌、棉花尖孢镰刀菌、禾谷镰孢菌和棉花立枯丝核菌有抑菌作用。