[发明专利]碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物及其制备方法有效
申请号: | 201510395854.9 | 申请日: | 2015-07-07 |
公开(公告)号: | CN104945579A | 公开(公告)日: | 2015-09-30 |
发明(设计)人: | 刘名茗;王小洁;皮江燕;黄蓉;杜亚媚;冯雄汉;刘凡 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C08F292/00 | 分类号: | C08F292/00;C08F222/38;C08F220/54;C08J9/28;C09C1/44;C09C3/08 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 徐绍新 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纳米 表面 溶菌酶 分子 印迹 聚合物 及其 制备 方法 | ||
1.一种碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,它是以溶菌酶为模板分子,1-烯丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体和N-叔丁基丙烯酰胺为混合功能单体,丙烯酰胺修饰碳纳米管为基质,pH9的Tris-HCl缓冲溶液为反应体系,在交联剂、引发剂和催化剂作用下制得的对溶菌酶具有选择性识别能力的表面分子印迹聚合物。
2.如权利要求1所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述丙烯酰胺修饰碳纳米管、溶菌酶、N-叔丁基丙烯酰胺、1-烯丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体的重量比依次为(20~40)∶(15~25)∶(30~120)∶(160~400)。
3.如权利要求1所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述丙烯酰胺修饰碳纳米管、溶菌酶、N-叔丁基丙烯酰胺、1-烯丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体的重量比依次为30∶18∶(80~100)∶(180~220)。
4.如权利要求1所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述交联剂为N,N’-亚甲基双丙烯酰胺。
5.如权利要求4所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述交联剂与丙烯酰胺修饰碳纳米管的重量比为3.3~5∶1。
6.如权利要求1所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述引发剂为过硫酸铵。
7.如权利要求1所述的碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物,其特征在于:所述催化剂为N,N,N',N'-四甲基乙二胺。
8.一种制备碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将15~25mg溶菌酶溶于30mL pH9的Tris-HCl缓冲溶液中,加入30~120mg N-叔丁基丙烯酰胺和160~400mg 1-烯丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体,常温下磁力搅拌2h;
2)加入20~40mg丙烯酰胺修饰碳纳米管,超声分散均匀,加入60~200mg N,N’-亚甲基双丙烯酰胺,通氮气除氧15-20分钟;
3)加入20-40mg过硫酸铵,50-100μL N,N,N',N'-四甲基乙二胺,继续通氮气除氧15-20分钟,然后在无氧条件下常温磁力搅拌12-48h;
4)将固液两相分离,对固相产物采用pH9的Tris-HCl缓冲溶液洗涤3-5次,再用超纯水洗脱至无蛋白质残留,冷冻干燥,即得。
9.如权利要求8所述的制备碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将18mg溶菌酶溶于30mL pH9的Tris-HCl缓冲溶液中,加入80~100mg N-叔丁基丙烯酰胺和180~220mg 1-烯丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体,常温下磁力搅拌2h;
2)加入30mg丙烯酰胺修饰碳纳米管,超声分散均匀,加入100~150mg N,N’-亚甲基双丙烯酰胺,通氮气除氧15-20分钟;
3)加入40mg过硫酸铵,50μL N,N,N',N'-四甲基乙二胺,继续通氮气除氧15-20分钟,然后在无氧条件下常温磁力搅拌12-48h;
4)将固液两相分离,对固相产物采用pH9的Tris-HCl缓冲溶液洗涤3-5次,再用超纯水洗脱至无蛋白质残留,冷冻干燥,即得。
10.如权利要求8所述的制备碳纳米管表面溶菌酶分子印迹聚合物的方法,其特征在于:所述丙烯酰胺修饰碳纳米管是对羧基化碳纳米管进行表面化学修饰得到的,所述羧基化碳纳米管的管径≤8nm,长度为20~30μm,羧基含量为3.86wt%,纯度>95%,表面化学修饰的方法是:称取0.6g羧基化碳纳米管,加入60mL二氯亚砜和10滴二甲基甲酰胺,70℃回流24h,溶剂蒸干后,继续加入3g丙烯酰胺和50mL二甲基甲酰胺,超声溶解10min,于45℃回流24h,产物用超纯水洗至中性,60℃烘干。
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