[发明专利]一种抗菌素及其制备方法与应用有效
申请号: | 201510396965.1 | 申请日: | 2015-07-07 |
公开(公告)号: | CN105002240B | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
发明(设计)人: | 刘杨;刘黎玲;李夏云;肖湘 | 申请(专利权)人: | 汕头大学 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C07K14/315;C07K1/14;A61K38/16;A61P31/04 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 温旭;张泽思 |
地址: | 515063 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗菌素 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗菌素的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一,将乳酸乳球菌ATCC 11454 菌种活化后,挑取单菌落进行培养,离心处理后去除菌种,获得乳酸乳球菌发酵液;
步骤二,将步骤一所得发酵液pH 调至2 以下,再利用旋转蒸发浓缩,再将pH 调至初始值,然后离心处理后取上清,过滤处理后得到乳酸乳球菌发酵浓缩液;
步骤三,取步骤二所得发酵浓缩液与PBS 缓冲液以重量比2:1 混合,再加入Triton X-114 和MgSO4混合液构成双水相体系,离心处理使双水相达到相平衡后取上相,再用PBS缓冲液稀释后制得包含乳酸链球菌素和Triton X-114 的抗菌素;
其中步骤一所述培养包括活化培养24-26h,平板划线培养18-20h,种子液培养20-22h和扩大培养16-18h ;所述培养均在29-31℃恒温培养箱中;
步骤三所述发酵浓缩液、所述Triton X-114 和所述MgSO4重量比为(15.5-15.7) :(0.95-1.05) :(0.144-0.156) ;所述PBS 缓冲液浓度为0.018-0.022M。
2.根据权利要求1 所述制备方法,其特征在于,步骤二所述过滤处理为用0.2-0.25μm的滤膜过滤至少一次除菌。
3.根据权利要求1 所述制备方法,其特征在于,所述双水相体系的相比为0.21-0.23。
4.根据权利要求1-3 任一条所述制备方法,其特征在于,所述离心处理为在24-26℃,11000-13000rpm 的条件下离心28-32min。
5.一种根据权利要求1-3 任一项所述制备方法制备的抗菌素。
6.根据权利要求5 所述抗菌素的应用,其特征在于,所述抗菌素对革兰氏阳性细菌有抑菌效果。
7.根据权利要求6 所述应用,其特征在于所述革兰氏阳性细菌包括枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌。
8.根据权利要求7 所述应用,其特征在于,所述抗菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌效价为9143IU/mL,所述抗菌素中乳酸链球菌素效价为3210IU/mL。
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