[发明专利]轮虫标本的短期固定保存方法和长期固定保存方法

说明书

技术领域

本发明涉及轮虫的保存，具体地，涉及一种被甲不发达、常规方法固定后易收缩变形的轮虫标本及其短期固定保存方法和长期固定保存方法。

背景技术

轮虫是一类微小的多细胞动物，体长一般在50μm～2000μm之间，具有种类繁多、食性多样和繁殖速率快的特点，广泛分布于自然界的各类水体中，是浮游生物的重要组成部分。在野外生态学研究中，自然水体中的轮虫群落的物种丰富度和多样性指数等对水质变化较为敏感，常被用来评价水体富营养化和受污程度。在室内生态学研究中，某些轮虫(如晶囊轮虫)常以小型轮虫作为食物，如此同时，这些小型轮虫在捕食压力下形成了反捕食对策，由于轮虫具备繁殖速率快和世代时间短等特征，轮虫间的捕食与反捕食的对策为研究物种的种间关系、协同进化和微进化提供了便利。

轮虫样品的野外采集与物种鉴定、轮虫个体形态的度量是研究轮虫群落和种群生态学的基础和前提。目前，主要以4％的福尔马林溶液或者10％的乙醇溶液作为固定剂来处理轮虫样品，以达到保存轮虫样品的目的。但对于一些被甲无或者被甲不发达的轮虫而言，这种方法固定后的个体极易发生形态变化，它们常出现头冠和(或)足缩入体内、躯干部蜷曲和体长减小等身体变形的现象，既不利于人们根据其外部形态结构特征鉴别种类，也影响了有关其外形生物学特征研究结果的准确性。

发明内容

本发明的目的是提供一种被甲不发达、常规方法固定后易收缩变形的轮虫标本及其短期固定保存方法和长期固定保存方法，通过这两种方法制备的轮虫标本与轮虫活体相比体貌变化小，便于测量体长、体宽和种类的鉴别。

为了实现上述目的，本发明提供了一种轮虫的短期固定保存方法，该短期固定保存方法由以下步骤组成：

(1)将轮虫的活体样品置于水中进行热处理；

(2)将热处理后的轮虫样品取出，然后进行保存。

本发明还提供了一种轮虫的长期固定保存方法，该长期固定保存方法包括：

(1)将轮虫的活体样品置于水中进行热处理，然后冷却；

(2)将甲醛加入至所述轮虫样品中以对冷却后的轮虫标本进行保存。

本发明还提供了一种轮虫标本，该轮虫标本是通过上述方法制备而成的。

通过上述技术方案，本发明提供了一种轮虫标本及其短期固定保存方法和长期固定保存方法。其中，短期固定保存方法直接通过热水处理轮虫活体以达到短期固定保存(阴暗条件下可以保存2-3天，4℃的冰箱环境中可以保存7天)的目的；长期固定保存方法首先通过热水处理轮虫活体，然后再用福尔马林稀释溶液浸泡便可达到长期固定保存的效果。在上述两种固定保存方法中得到的轮虫标本均可以保持轮虫活体的原有体型(轮虫标本与轮虫活体之间的显著性差异P值均＜0.05)，特别是未发生头冠和/或足等缩入体内、躯干部蜷曲和体长变短等体貌变形，以便于人们在显微镜下准确测定体长和体宽，鉴别其种类。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是实施例1中制得的轮虫标本放大40倍的个体形态图；

图2是对比例1中制得的轮虫标本放大40倍的个体形态图；

图3是对比例2中制得的轮虫标本放大40倍的个体形态图；

图4是轮虫活体、实施例1中轮虫标本和对比例1-2中轮虫标本的体长统计图；

图5是轮虫活体、实施例1中轮虫标本和对比例1-2中轮虫标本的体宽统计图；

图6是实施例6中制得的轮虫标本放大40倍的个体形态图；

图7是轮虫活体、实施例6中轮虫标本和对比例1-2中轮虫标本的体长统计图；

图8是轮虫活体、实施例6中轮虫标本和对比例1-2中轮虫标本的体宽统计图。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

本发明提供了一种轮虫的短期固定保存方法，该短期固定保存方法由以下步骤组成：

(1)将活体轮虫样品置于水中进行热处理；

(2)将热处理后的轮虫样品取出，然后进行保存。

在上述短期固定保存方法中，热处理的温度和时间均可以在宽的范围内选择，为了使制得的轮虫标本不发生变形，优选地，热处理至少满足以下条件：热处理的温度为70-90℃，热处理的时间为2min-5min。