[发明专利]甾体皂苷RCE-4在制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途

说明书

本发明公开了一种从吉祥草中分离制备的甾体皂苷RCE‑4在制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途。本发明所分离得到的RCE‑4对正常细胞具有较弱的细胞毒性，而对人肝癌细胞H22和HepG2具有较强的细胞毒性；对H22荷腹水瘤和实体瘤小鼠均具有显著的抗肿瘤作用，而且对液血液常规指标、血液生化指标和组织形态学均没有显著性的副作用；与当前的临床上使用的抗癌药相比，具有效果相当，但毒副作用小的优势。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种具有抗肿瘤活性化合物甾体皂苷RCE-4在制备预防或治疗肿瘤的药物中的用途。

背景技术

吉祥草(Reineckia carnea(Andr.)Kunth.)为百合科铃兰族吉祥草属单种属多年生常绿草本植物，又名观音草、松寿兰、小叶万年青、竹根七、蛇尾七等。其性味甘平，具有润肺止咳、理血、解毒、补肾接骨、祛风除湿的功效，主要用于肺结核、咳嗽咯血、慢性支气管炎、哮喘，风湿性关节炎，外用治跌打损伤、骨折等疾病的治疗，被土家、苗家民间看着是“神圣的草”。据分析其主要化学成分包括：甾体皂苷类、黄酮类、三萜类、脂肪酸类、生物碱、神经酰胺、环醇、烷烃及Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Mg、Na、K等金属元素。是一种很具有开发价值的少数民族的草药资源。

当前恶性肿瘤成为了严重威胁人口健康的重大疾病。当前全球每年恶性肿瘤死亡人数约为700万人，到2030年每年因癌症死亡的人数将可能达到1700万。据世界卫生组织统计，目前全球平均每8个死亡病例中就有1人死于癌症，这比艾滋病、结核病和疟疾导致的死亡人数总和还要高。而且，每年全球还有超过1200万人被确诊患上癌症。其中中国癌症死亡人数占全球24％，且成低龄化趋势。手术、放疗和化疗仍然是临床上肿瘤治疗的主要手段，其中化疗为其重要手段之一，然后其高额的费用和严重的毒副作用，成为了限制其临床应用的瓶颈。近年来，来源于少数民族的许多草药，由于其抗肿瘤疗效确切、毒副作用小、在民间临床用药历史悠久等多方面综合优势，而成为了治疗肿瘤活性先导化合物的宝库。

发明内容

本发明发明人经过广泛深入的研究，从土家、苗家民间草药吉祥草中分离制备得到的甾体皂苷成分：(1β,3β,5β,25S)-螺甾烷-1,3-二醇1-[α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-木吡喃糖苷]，即25(S)-5β-spirostan-1β,3β-diol1-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranoside(RCE-4)，并且经研究发现该成分对H22和HepG2肝癌细胞及对荷H22瘤昆明小鼠均具有较好的抗肿瘤作用，通过与治疗肝癌的阳性药卡培他滨比较，与其抗肿瘤效果类似，但未见有明显的毒副作用。目前还未见有此化合物的制备分离及治疗肝癌相关的报道。

本发明的一个目的是提供一种从吉祥草中制备分离甾体皂苷RCE-4方法。本发明方法包括吉祥草样品的提取及RCE-4的分离和纯化。

本发明具体地是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种分离制备甾体皂苷RCE-4的方法，包括下面步骤：

a)用溶剂提取吉祥草，过滤，浓缩；

b)将a)步得到的浓缩产物用水溶解，用乙酸乙酯萃取一段时间，优选超声萃取1～4小时；

c)将b)步萃取得到的乙酸乙酯萃取物浓缩，用氯仿-甲醇梯度洗脱分离，收集馏分1-16，将所得的其中馏分15经凝胶色谱分离纯化。

甾体皂苷RCE-4为针状晶体，呈白色。化学名称为：(1β,3β,5β,25S)-螺甾烷-1,3-二醇1-[α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-木吡喃糖苷]，是一种螺旋甾烷醇皂苷，分子式为C38H62O12。溶解之后为无色透明液体。其分子结构如下式所示：