[发明专利]一种抗高血压活性肽、其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗高血压活性肽、其制备方法及应用。

背景技术

高血压是我国最常见的心血管疾病，其发生率在成年人中高达20％，高血压患者由于动脉血压长期高于正常血压，不仅能引起头痛、头昏、心悸等症状，而且能引起患者心、脑、肾等器官损害，导致出血性脑卒中、心肌梗死、心力衰竭和脑血栓并发症，使患者偏瘫或死亡，明显降低患者生活质量。高血压病的病因复杂，已知体内许多系统与血压的调节有密切关系，抗高血压药物可以作用于影响血压调节的任一环节而使血压下降。当前常见的治疗高血压的药物有以下六种：利尿剂(可能引起低血钾症，影响糖代谢，使糖耐量下降)，β－阻滞剂(可带来中枢神经系统、消化系统以及血管系统的不良反应)，α－阻滞剂、钙拮抗剂(会导致水肿、头痛、潮红、多尿、低血压以及心脏传导受阻)，血管紧张素II受体阻滞剂(可引起干咳、血钾高、甚至血管性水肿)和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)。由于现有大部分药物都有较强的副作用，所以科学家们一直致力于开发高效低毒的药品或食品，含有抑制血管紧张素转换酶(ACE)活性的小肽的功能食品或药品，使高血压患者得益，研究表明，该类药物优于一般血管扩张药，在使血压下降时，心、肾血流量不下降；优于钙拮抗剂，不会引起水钠潴留，不加快心率；优于α-阻滞剂，不会引起体位性低血压；优于老一代降压药，无中枢作用；优于硝酸酯类药物，无耐药性、无肝脏首过效应和无停药反跳现象[吴金珊,李佳.抗高血压药物的研究进展和临床应用[J].中国实用医药,2009,4(23):231-232.]。专利CN200710047836.7通过水解酪蛋白得到的抗高血压活性三肽Asn-Pro-Trp，其具有一定的降血压效果，具体地，该活性三肽对ACE抑制活性为85.5％，其采用5mg/kg的剂量给药5天后，大鼠的血压稳定在176mmHg，并且后续血压有所回升；亦有专利CN201210247822.0通过合成方法制备得到抗高血压活性三肽：缬氨酸-异亮氨酸-脯氨酸，其ACE抑制活性为仅为36.58±4.66％。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种结构不同且具有良好的ACE抑制活性和明显的降血压效果的抗高血压活性肽、其制备方法及应用。

为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种抗高血压活性肽，所述的活性肽的氨基酸序列为：茶氨酸-γ-氨基丁酸-脯氨酸。

一种抗高血压活性肽的制备方法，其通过将脯氨酸二氯树脂和芴甲氧羰基γ-氨基丁酸在偶联剂和有机溶剂的存在下，进行偶联得到中间产物；再将所述的中间产物和芴甲氧羰基茶氨酸在偶联剂和有机溶剂的存在下，进行偶联，经纯化后得到所述的抗高血压活性肽。

具体地，一种抗高血压活性肽的制备方法，其通过将脯氨酸二氯树脂和芴甲氧羰基γ-氨基丁酸在偶联剂和有机溶剂的存在下，进行偶联50～70分钟，然后经洗涤得到中间产物；再将所述的中间产物和芴甲氧羰基茶氨酸在偶联剂和有机溶剂的存在下，进行偶联50～70分钟，经洗涤、纯化后得到所述的抗高血压活性肽。

进一步地，所述的偶联剂为O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸，所述的有机溶剂为N,N-二异丙基乙胺。

进一步地，经所述洗涤得到所述的中间产物的具体方法为：将所述的脯氨酸二氯树脂和所述的芴甲氧羰基γ-氨基丁酸进行偶联反应后，用体积比为1:4～6的哌啶和二甲基甲酰胺混合液洗涤多次，然后用六氢吡啶进行脱保护，脱保护结束后再用体积比为1:4～6的哌啶和二甲基甲酰胺混合液洗涤多次，得到所述的中间产物。

进一步地，经所述的洗涤、纯化后得到所述的抗高血压活性肽的具体方法为：将所述的中间产物和所述的芴甲氧羰基茶氨酸进行偶联反应后，用体积比为1:4～6的哌啶和二甲基甲酰胺混合液洗涤多次，然后用六氢吡啶进行脱保护，脱保护结束后再用体积比为1:4～6的哌啶和二甲基甲酰胺混合液洗涤多次，然后经抽干、纯化后得到所述的抗高血压活性肽。

进一步地，采用半制备型反相高效液相色谱进行所述的纯化。

更进一步地，所述的半制备型反相高效液相色谱的反相柱为：VYDAC－C18柱；流动相为：溶液A为溶解于分析纯级乙腈的0.05％～0.15％(v/v)的三氟乙酸，溶液B为溶解于纯水的0.05％～0.15％(v/v)的三氟乙酸；洗脱梯度为：0min～25min：5％～30％的溶液A，95％～70％的溶液B；26min～55min：100％的溶液A；流速：0.5～1.5毫升/分钟。

此外，本发明还涉及该抗高血压活性肽在制备抗高血压的药品或食品中的应用。