[发明专利]植物雌蕊特异表达启动子OsPis1及其衍生物

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域。具体而言，本发明涉及一种水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1及其衍生物，该启动子能够在水稻转基因调控体系中特异性的驱动目标基因的表达。

背景技术

高等植物的生长发育是不同基因在时间和空间上有序表达和协同作用的过程。启动子作为转录水平上一个重要的调控元件，通过和众多转录因子的结合进而决定了基因的表达模式和表达强度。用组织特异表达启动子来驱动目的基因表达可有效地避免用组成型启动子所带来的一些诸如代谢负担之类的负面效应。因此，如何让外源基因在植物体内定向、高效、稳定的表达是植物基因工程研究的出发点和落脚点，深入研究启动子的结构、功能、作用模式等对于回答分子生物学中的一些基本理论问题具有重要意义。

由于植物的果实和种子是人类食物的主要来源，它们都是植物生殖器官发育的产物，而植物生殖发育的关键是花的形成，因此，对植物生殖器官尤其花的发育分子遗传的研究显得尤为重要。高等植物发育形成花器官的过程需要许多基因的协同表达。

水稻是非常重要的粮食作物之一，亦是功能基因组学研究的模式植物。水稻作为模式单子叶植物，是单子叶植物生殖器官发育研究的主要对象。尽管目前水稻等单子叶植物中均已经分离了多个决定花器官分化与发育的MADS-box基因和非MADS-box基因，但与双子叶植物相比，目前水稻等单子叶植物生殖器官即花发育分子遗传基础研究相对落后。因此，开展水稻等单子叶植物生殖器官特异表达启动子的遗传研究十分必要。

但是，目前人们对于生殖器官特异表达启动子的研究还不够深入，目前所开发出的生殖器官特异表达启动子种类非常有限，远远不能够满足科研人员在改良水稻品种过程中对启动子的需求。

发明内容

针对上述问题，本研究的目的就是从水稻中分离克隆生殖器官特异表达启动子，用于在雌蕊中特异性表达的一些功能基因或结构基因，为转基因水稻育种服务，来达到品种改良的目的，为长远的启动子改造和设计储备资源。而且，本发明希望获得一种分离鉴定本底信号低、特异性高的新型启动子，这种启动子对作物基因工程将有着重要的意义。

一方面，本发明提供一种水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1，其特征在于，所述水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1提取自水稻属植物。

在一种优选实现方式中，所述水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1包含：

1)序列表中SEQ ID No：1所示的DNA序列；或者

2)在严格条件下与含有1)中的DNA序列杂交后具有启动子功能的DNA序列；或者

3)与1)或2)限定的DNA序列具有70％-75％的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

4)与1)或2)限定的DNA序列具有75％-80％的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

5)与1)或2)限定的DNA序列具有80％-85％的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

6)与1)或2)限定的DNA序列具有85％-90％的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

7)与1)或2)限定的DNA序列具有90％-95％的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

8)与1)或2)限定的DNA序列具有95％以上的同源性，且具有启动子功能的DNA序列；或者

9)在SEQ ID NO:1中所示的核苷酸序列中添加一个或多个核苷酸后所获得的具有启动子功能的核苷酸序列；

10)在SEQ ID NO:1中所示的核苷酸序列中去除一个或多个核苷酸后所获得的具有启动子功能的核苷酸序列；

11)在SEQ ID NO:1中所示的核苷酸序列中取代一个或多个核苷酸后所获得的具有启动子功能的核苷酸序列。

在一种优选实现方式中，所述水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1提取自日本晴水稻。

另一方面，本发明提供一种含有所述水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1的重组表达载体或表达盒。

在一种优选实现方式中，所述重组表达载体为在植物表达载体的多克隆位点插入所述的水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1得到的重组质粒，在所述重组表达载体中，所述水稻雌蕊特异表达启动子OsPis1连接于载体中待表达的基因序列的上游

在一种优选实现方式中，所述待表达基因为水稻雌蕊特异表达基因。