[发明专利]一种靶向治疗用人工趋磁细菌及其构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 201510400517.4 申请日: 2015-07-09
公开(公告)号: CN105018401B 公开(公告)日: 2019-01-22
发明(设计)人: 刘陈立;赖旺生;沈玥;黄建东 申请(专利权)人: 中国科学院深圳先进技术研究院
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/70;A61K47/46;A61K41/00;C12R1/19;C12R1/42;C12R1/125;C12R1/225
代理公司: 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 代理人: 彭家恩;郭燕
地址: 518055 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 趋磁细菌 靶向治疗 定位蛋白 密度感应 靶向部位 细菌表面 元件控制 治疗基因 富集 构建 靶向治疗作用 表达序列 基因结构 生物亲和 外加磁场 靶向性 磁颗粒 可用 感知 制备 应用 细菌 体内 治疗
【权利要求书】:

1.一种靶向治疗用人工细菌,其特征在于,所述细菌内包含能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构,以及密度感应元件控制的治疗基因表达序列,所述定位蛋白能够通过生物亲和作用与磁颗粒相连;

所述能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构是如SEQ ID NO:1所示的Pet23asp-eGFP-aida质粒;所述密度感应元件控制的治疗基因表达序列包括如SEQ ID NO:2所示的JRI2YFP质粒。

2.根据权利要求1所述的人工细菌,其特征在于,所述细菌选自能够与生物体相容的非致病性细菌,所述非致病性细菌为大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸菌或枯草芽孢杆菌。

3.根据权利要求2所述的人工细菌,其特征在于,所述非致病性细菌为大肠杆菌。

4.据权利要求1所述的人工细菌,其特征在于,所述生物亲和作用为生物素-亲和素作用,具体是通过生物素化的定位蛋白抗体介导所述定位蛋白与亲和素标记的纳米磁颗粒相连。

5.据权利要求1所述的人工细菌,其特征在于,所述治疗基因选自侵袭因子、细胞溶解素、干扰素、细胞因子或重组疫苗的基因。

6.一种靶向治疗用人工趋磁细菌,其特征在于,所述细菌内包含能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构,以及密度感应元件控制的治疗基因表达序列,所述细菌表面顶端表达有所述定位蛋白,所述定位蛋白通过生物亲和作用与磁颗粒相连,形成所述人工趋磁细菌;

所述能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构是如SEQ ID NO:1所示的Pet23asp-eGFP-aida质粒;所述密度感应元件控制的治疗基因表达序列包括如SEQ ID NO:2所示的JRI2YFP质粒。

7.一种人工趋磁细菌,其特征在于,所述细菌内包含能够在大肠杆菌表面顶端表达出增强绿色荧光蛋白的基因结构,以及密度感应元件控制的黄色荧光蛋白报告基因表达序列,所述细菌表面顶端表达有所述增强绿色荧光蛋白,所述增强绿色荧光蛋白通过生物素化的增强绿色荧光蛋白的抗体与亲和素标记的纳米磁颗粒相连,形成所述人工趋磁细菌;

所述能够在大肠杆菌表面顶端表达出增强绿色荧光蛋白的基因结构是如SEQ ID NO:1所示的Pet23a sp-eGFP-aida质粒;所述密度感应元件控制的黄色荧光蛋白报告基因表达序列是如SEQ ID NO:2所示的JRI2YFP质粒。

8.一种构建靶向治疗用人工细菌的方法,其特征在于,所述方法包括:将能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构以及密度感应元件控制的治疗基因表达序列导入细菌内;其中所述定位蛋白能够通过生物亲和作用与磁颗粒相连;

所述能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构是如SEQ ID NO:1所示的Pet23asp-eGFP-aida质粒;所述密度感应元件控制的治疗基因表达序列包括如SEQ ID NO:2所示的JRI2YFP质粒。

9.一种构建靶向治疗用人工趋磁细菌的方法,其特征在于,所述方法包括:将能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构以及密度感应元件控制的治疗基因表达序列导入细菌内;诱导所述定位蛋白表达,并将所述定位蛋白通过生物亲和作用与磁颗粒相连,形成所述人工趋磁细菌;

所述能够在细菌表面顶端表达出定位蛋白的基因结构是如SEQ ID NO:1所示的Pet23asp-eGFP-aida质粒;所述密度感应元件控制的治疗基因表达序列包括如SEQ ID NO:2所示的JRI2YFP质粒。

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