[发明专利]一种专用于米曲霉液体发酵生产胞外酶制剂的复合蛋白胨制备方法

权利要求书

1.一种专用于米曲霉液体发酵生产胞外酶制剂的复合蛋白胨制备方法，其特征包括如下步骤：

(1)精选新鲜猪骨、猪内脏、猪精肉。大豆经筛选、低温脱脂后，粉碎过100-200目筛。以上均作原料备用；

(2)新鲜猪骨、猪内脏、猪精肉置于盆内，用40-50℃水冲洗一遍，将原料用相应机器进行粉碎，骨头面积不超过2cmX2cm，内脏和精肉用绞肉机绞2-3次；

(3)新鲜猪骨、猪内脏、猪精经过碱、酸处理工艺；

(4)将碱、酸处理的猪原料和脱脂大豆粉，加入到高压蒸汽炉内，将压力升至0.1Mpa-0.2Mpa，保持压力平衡，温度为150-180℃，抽提3-4小时，获得抽提液；

(5)将骨汤在适当条件进行酶解；

(6)酶解结束后，调pH值至6.0-6.5，在不断搅拌下将料液升温至75℃-85℃后，并煮开5-10分钟，加入活性白陶土脱色，用量为原料中蛋白总量的1-2％，时间是1-1.5小时；

(7)将酶解液经板框过滤，获得滤液，经过0.3μm～0.5μm超滤膜过滤，以除去致病菌；

(8)将澄清酶解液经双效蒸发器，在60℃-80℃减压浓缩，获得浓缩液；

(9)将浓缩液经喷雾塔中进行喷雾干燥成粉状，控制进风温度160℃-175℃，出风温度85℃-95℃，得到产品。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的原料各重量比例范围为猪骨25-35％，猪内脏10-20％，猪精肉10-20％，脱脂大豆粉25-55％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的猪原料碱、酸处理工艺为：A：将骨、内脏、精肉混合原料，按照质量比1∶2-2.5的比例加入0.1％-0.3％的NaOH溶液，浸泡12-18小时；B：加入质量比5-10倍的自来水浸泡和清洗碱处理后的猪原料，在动物原料中加入1∶2-2.5比例的稀醋酸，浸泡1-4小时；C：将醋酸处理后的清洗两遍。第一遍，加2-4倍质量的水，用0.1％-0.3％NaOH调pH为7.0，水洗0.5-1小时。第二遍，加入2-4倍质量的水，水洗0.5-1小时。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的酶解工艺为：将抽提液温度冷却并控制在45-55℃，用0.1-0.3％的NaOH溶液调节pH到9.0后，添加碱性蛋自酶，进行酶解1-3小时，当pH降低到6.0-7.0时，升高温度到60-70℃，添加木瓜酶，进行酶解2-4小时，降低温度到40-50℃，调节pH到7.0-8.0后，添加胰蛋白酶，进行酶解1-3小时，最后再调节pH到7.0-8.0后，温度维持在40-50℃，添加复合酶，进行酶解2-4小时。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的酶具体为：胰蛋白酶来自于牛胰腺。碱性蛋白酶为地衣芽孢杆菌2709酶。复合酶由牛胰腺蛋白酶、中性蛋白酶(枯草杆菌1398酶)组成，总酶活单位比例为1∶3。