[发明专利]一种耐久肠球菌素突变体、制备方法及其应用

说明书

本发明提供一种耐久肠球菌素突变体、制备方法及其应用，涉及食品领域。耐久肠球菌素突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还要求保护所述耐久肠球菌素突变体的编码基因、制备方法及其应用。所述制备方法，包括如下步骤：将携带有耐久肠球菌素突变体编码基因的载体导入宿主菌，诱导所述宿主菌表达耐久肠球菌素突变体。本发明耐久肠球菌素突变体具有较高活性和稳定性，制备方法简单，有望应用于食品级防腐剂领域中。

技术领域

本发明涉及食品领域，具体涉及一种耐久肠球菌素突变体、制备方法及其应用。

背景技术

乳酸菌细菌素是一类乳酸菌代谢过程中由核糖体合成并分泌到环境中具有抑菌活性的蛋白质或多肽，在食品保藏中极具重要意义。自乳酸链球菌素Nisin商业应用以来，细菌素的研究开发一直是相关领域的热点。耐久肠球菌素Durancin GL(GenBank：HQ696461.1)是从西班牙干酪中分离的耐久肠球菌41D株所产生的新型细菌素，尤其对李斯特菌等食源性人体致病菌具有靶向抑制作用(Du,Lihui，Somkuti,George A.，Renye,JohnA.,Jr.，Huo,Guicheng.Journal of Food Safety,2012,32(1):74-83.)。但是，耐久肠球菌素Durancin GL活性较低。耐久肠球菌素Durancin GL的生物合成基因(GenBank登录号HQ696461.1)包括结构基因(durA)和免疫基因(durB)，其中结构基因编码耐久肠球菌素Durancin GL前体，免疫基因编码耐久肠球菌素Durancin GL的免疫蛋白以防止表达的细菌素对宿主的伤害。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有较高活性的耐久肠球菌素突变体。

本发明的另一目的在于提供耐久肠球菌素突变体的编码基因。

本发明的再一目的在于提供耐久肠球菌素突变体的制备方法及其在食品级防腐剂中的应用。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

耐久肠球菌素突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本发明还要求保护所述耐久肠球菌素突变体的编码基因。

优选的技术方案中，所述编码基因的序列如SEQ ID NO:3所示。

本发明还要求保护含有所述编码基因的表达盒、重组载体、重组菌或细胞系。

本发明还要求保护制备所述耐久肠球菌素突变体的方法，包括如下步骤：将携带有耐久肠球菌素突变体编码基因的载体导入宿主菌，诱导所述宿主菌表达耐久肠球菌素突变体。

本发明还要求保护所述耐久肠球菌素突变体在制备食品级防腐剂方面的应用。

本发明耐久肠球菌素突变体具有较高活性和稳定性，制备方法简单，有望应用于食品级防腐剂领域中。

附图说明

图1突变质粒的PCR鉴定电泳结果，M为DS 5000 DNA Marker，1为突变质粒的PCR产物。

图2DE3-pGEX-durAB-K21A的PCR鉴定电泳分析，M为DS 5000 DNAMarker，1为DE3-pGEX-durAB-K21A的PCR产物。

图3耐久肠球菌素Durancin GL及其突变体K21A的抑菌活性，其中1是耐久肠球菌素Durancin GL抑菌圈，2为耐久肠球菌素突变体K21A抑菌圈。

图4耐久肠球菌素突变体K21A稳定性。

图5耐久肠球菌素Durancin GL的稳定性。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步阐述。