[发明专利]一种提高尼可霉素产量的方法

说明书

一种提高尼可霉素产量的方法。本发明涉及微生物领域，具体提供了一种圈卷产色链霉菌发酵培养基以及利用该培养基制备尼可霉素的方法。本发明通过向发酵培养基中添加适量吐温80，并进一步优化发酵培养基各具体组分的种类和用量，以及控制其他培养条件，提高尼可霉素的产量。本发明尼可霉素的产量可高达42600μg/mL，且方案简单、成本低廉，适用于工业化大规模生产。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体提供了一种圈卷产色链霉菌发酵培养基以及利用该培养基制备尼可霉素的方法。

背景技术

尼可霉素是重要的肽基核苷类抗生素，其对农作物、果蔬及一些经济植物的真菌病害有良好的防治作用，并且对环境友好，适宜在农业生产中大规模推广使用。传统的制备方法汇总，通常采取诱变筛选优良菌株的方式来提高尼可霉素的产量，但是这种方式，具有不确定因素多，筛选工作大，育种缓慢，难以有效提高尼可霉素产量的缺点。

尼可霉素与几丁质合成酶的天然底物UDP-N-乙酰葡萄糖胺具有类似的结构，而竞争性地抑制几丁质合成酶，表现出抗真菌、杀昆虫和杀螨虫等多种生物活性。同时,尼可霉素对哺乳动物、蜜蜂、植物和细菌等毒性极低，且在自然界中易被降解，而被认为是一种理想的农用抗生素。最近的研究表明它对一些危及生命的几种致病真菌也有明显的抑制作用，可用于人体深部真菌感染疾病的治疗。

目前，现有技术制备尼可霉素的方法存在产量低、原料消耗较大的问题。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明旨在于提供一种圈卷产色链霉菌发酵培养基以及利用该培养基制备尼可霉素的方法。

本发明所使用的本发明所使用的圈卷产色链霉菌BJX005，已于2015年2月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.10523，分类命名为圈卷产色链霉菌(Streptomyces ansochromogenes)。

圈卷产色链霉菌BJX005菌株，孢子丝钩状或圈卷很少成圈环。孢子球形、椭圆形。

本发明提供了一种利用圈卷产色链霉菌制备尼可霉素的方法，包含以下步骤:

步骤(1)：将保藏编号为CGMCC No.10523的圈卷产色链霉菌BJX005的种子液接种于含有质量浓度为0.01％～0.03％的吐温80的发酵培养基中进行发酵培养，得发酵液；

步骤(2)：从所述发酵液中提取尼可霉素。

本发明适量吐温80的加入，可以与发酵培养基的其他组分发生良好的协同作用，从而有效提高尼可霉素的产量。

本发明所述步骤(1)中发酵培养基包含以下组分：按质量百分比计，玉米淀粉2.5～3％、大豆饼粉2～3％、酵母粉0.2～0.3％、氯化钠0.4～0.6％、硫酸铵0.04～0.05％、碳酸钙0.45～0.5％，消泡剂0.02～0.025％，吐温800.01％～0.03％，余量为水；调节pH为6.0～7.5，优选6.8。

所述发酵培养器皿采用8～10层纱布封口后，放置于120～125℃温度下灭菌30～40min。

进一步地，本发明优选所述步骤(1)中发酵培养基包含以下组分：按质量百分比计，玉米淀粉3％、大豆饼粉3％、酵母粉0.2％、氯化钠0.6％、硫酸铵0.04％、碳酸钙0.5％，消泡剂0.02％，吐温800.02％，余量为蒸馏水，调节pH为6.8。本发明所述消泡剂优选为有机硅类消泡剂，更优选为聚硅氧烷类消泡剂。

本发明所述步骤(1)中圈卷产色链霉菌的种子液接种量为为4～10％(v/v)；