[发明专利]黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因及其编码蛋白和应用在审
| 申请号： | 201510409303.3 | 申请日： | 2015-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN105087613A | 公开（公告）日： | 2015-11-25 |
| 发明（设计）人： | 高丽萍;代新龙 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/54 | 分类号： | C12N15/54;C12N9/10;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/60 |
| 代理公司： | 合肥顺超知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 34120 | 代理人： | 杨天娇 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黄酮 葡萄 糖基转移酶 csugt75l12 基因 及其 编码 蛋白 应用 | ||
1.一种黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因，其特征在于，该基因具有如SEQIDNO：1所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因，其特征在于，所述黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因在黄酮醇第七位羟基发生糖苷化，所述黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因应用于单糖苷生物合成。
3.一种如权利要求1或2所述的黄酮醇7-O-葡萄糖基转移CsUGT75L12基因的编码蛋白，其特征在于，所述编码蛋白具有如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。
4.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒含有如权利要求1所述黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因的核苷酸序列。
5.一种如权利要求5所述的重组质粒的构建方法，其特征在于，将黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因连接到pMal-c2X载体的多克隆位点中构建获得，命名为pMal-c2X-CsUGT75L12。
6.一种转基因工程菌，其特征在于，所述转基因工程菌含有如权利要求5所述的重组质粒，或其基因组中整合有外源的如权利要求1所述的黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因核苷酸序列。
7.根据权利要求7所述的转基因工程菌，其特征在于，所述转基因工程菌为含有所述重组质粒的大肠杆菌Novablue(DE3)菌株，或其基因组中整合有所述的黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因核苷酸序列的大肠杆菌Novablue(DE3)菌株。
8.一种重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白为含有如权利要求4所述的黄酮醇7-O-葡萄糖基转移酶CsUGT75L12基因的编码蛋白，具有如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。
9.根据权利要求9所述的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白作为催化酶，通过建立最适酶反应条件，得到黄酮醇7-O-葡萄糖苷。
10.根据权利要求10所述的重组蛋白，其特征在于，所述最适酶反应条件为：反应体系PH为8.5～9.5，反应温度为30～37℃，反应时间为35～42min，酶加入量为0～25ug。
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