[发明专利]疫苗组合物及其在刺激免疫反应中的用途

说明书

本申请是2008年2月28日提交的题为“新的方法和组合物”的国家申请号为200880014359.7(PCT/EP2008/052448)的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及新的疫苗组合物及其用于刺激哺乳动物尤其人中的免疫反应的用途，特别是用于预防和治疗病原体所致的感染。具体地，本发明涉及能够在受试者中诱导CD4+和CD8+T细胞反应以及抗体反应而不依赖于复杂的初免-加强(prime-boost)方案的组合物。

背景技术

十九世纪晚期开始，灭活的整个有机体就已成功地用于疫苗接种。近来，采用了涉及给予提取物、亚基、类毒素和荚膜多糖的疫苗。自从可以使用基因工程技术以来，重组蛋白的使用成为了受欢迎的策略，它消除了与使用来自天然来源的纯化蛋白相关的一些风险。

早期的疫苗方法基于在体内刺激免疫反应的某些方面的蛋白的给药。随后理解到还可以通过给予可以被宿主转录和翻译成免疫原性蛋白的DNA来增加免疫反应。

哺乳动物免疫反应具有两个重要的组分：体液反应和细胞介导的反应。体液反应包括循环抗体的产生，该循环抗体结合其所特异性的抗原，从而中和抗原并有助于其随后的清除，这种清除是通过涉及其他细胞毒性或吞噬性细胞的过程达成的。B细胞负责产生抗体(浆B细胞)，并保持免疫性体液记忆(记忆B细胞)，即，在第一次接触抗原(例如，通过疫苗接种)后若干年识别该抗原的能力。细胞介导的反应涉及许多不同类型的细胞的相互影响，尤其是T细胞。T细胞分为一些不同的亚型，主要是CD4+和CD8+细胞。

诸如巨噬细胞和树突细胞等抗原呈递细胞(APC)充当免疫系统的守卫，屏蔽机体与外来抗原。当APC检测到胞外的外来抗原时，将这些抗原吞噬(吞入)到APC内，这些抗原在此被加工成较小的肽。随后，这些肽被呈递到APC表面的II类主要组织相容性复合体(MHCII)上，它们在此可以被表达CD4表面分子的抗原特异性T淋巴细胞(CD4+T细胞)识别。当CD4+T细胞在存在其他足够的共刺激信号的条件下，识别它们在MHCII分子上的特异性抗原时，它们被激活，并分泌一批细胞因子，这些细胞因子随后激活其他组的免疫系统。一般地，CD4+T细胞根据抗原识别后它们所产生的反应类型被分为1类辅助性T细胞(Th1)或2类辅助性T细胞(Th2)亚型。在识别肽-MHCII复合体后，Th1CD4+T细胞分泌白细胞介素和细胞因子(如干扰素γ)，从而激活巨噬细胞释放有毒化学物质，如一氧化氮和活性氧/氮。IL-2和TNF-α也一般被分为Th1细胞因子。相比之下，Th2CD4+细胞一般分泌如IL-4、IL-5或IL-13等白细胞介素。

辅助性CD4+T细胞的其他功能包括为激活B细胞产生和释放抗体提供帮助。它们还可以参与抗原特异性CD8+T细胞的激活，CD8+T细胞是除CD4+T细胞之外的另一主要的T细胞亚型。

当在存在适当的共刺激信号的条件下，CD8+T细胞特异性的肽由I类主要组织相容性(MHCI)分子呈递到宿主细胞表面时，CD8+T细胞识别它们。为了呈递到MHCI分子上，外来抗原需要直接进入细胞内(胞质溶胶或核)，如在病毒或胞内细菌直接穿过宿主细胞或在DNA疫苗接种后的情况下。在细胞内，抗原被加工成小肽，这些小肽将被加载到MHCI分子上，重新定位到细胞表面。在激活后，CD8+T细胞分泌一批细胞因子，如干扰素γ，它们激活巨噬细胞和其他细胞。具体地，CD8+T细胞的一个亚组在激活后分泌溶解性和细胞毒性分子(如，粒酶(granzyme)、穿孔素)。这种CD8+T细胞被称为细胞毒性T细胞。

最近，描述了抗原呈递的另一途径，该途径涉及将胞外抗原或其片段加载到MHCI复合体上，它被称为“交叉呈递”。

T细胞反应的性质还受疫苗中所使用的佐剂的组成的影响。例如，已经显示含有MPL&QS21的佐剂能激活Th1CD4+T细胞分泌IFN-γ(Stewart等人Vaccine.2006,24(42-43):6483-92)。