[发明专利]一种可用于减缓单分子荧光漂白现象的除氧试剂及其应用方法有效
| 申请号： | 201510410258.3 | 申请日： | 2015-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN105044059B | 公开（公告）日： | 2017-08-29 |
| 发明（设计）人： | 葛良进;高勇谦;吴增丁;纪道锐;徐国伟 | 申请（专利权）人： | 深圳市瀚海基因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司44202 | 代理人： | 郝传鑫,熊永强 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区西丽街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 减缓 分子 荧光 漂白 现象 试剂 及其 应用 方法 | ||
1.一种可用于减缓单分子荧光漂白现象的除氧试剂，其特征在于，所述除氧试剂由以下体积份数的各组分组成：pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液74-86份，浓度为50-300mM的抗坏血酸钠溶液8-12份，浓度为20-200mM的酪氨酸溶液2-6份，浓度为5-50mM的还原谷胱甘肽溶液4-8份。
2.根据权利要求1所述的除氧试剂，其特征在于，所述除氧试剂由以下体积份数的各组分组成：pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液81份，浓度为50-300mM的抗坏血酸钠溶液10份，浓度为20-200mM的酪氨酸溶液4份，浓度为5-50mM的还原谷胱甘肽溶液5份。
3.根据权利要求1所述的除氧试剂，其特征在于，所述除氧试剂由以下体积份数的各组分组成：pH＝8、浓度为100mM的Tris-HCl缓冲液81份，浓度为200mM的抗坏血酸钠溶液10份，浓度为50mM的酪氨酸溶液4份，浓度为50mM的还原谷胱甘肽溶液5份。
4.根据权利要求1所述的除氧试剂，其特征在于，所述抗坏血酸钠溶液是采用pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液作为溶剂配制而成。
5.一种可用于减缓单分子荧光漂白现象的除氧试剂的应用方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)分别配制pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液，浓度为50-300mM的抗坏血酸钠溶液，浓度为20-200mM的酪氨酸溶液，浓度为5-50mM的还原谷胱甘肽溶液；
(2)取体积份数如下的上述各组分：pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液74-86份，浓度为50-300mM的抗坏血酸钠溶液8-12份，浓度为20-200mM的酪氨酸溶液2-6份，浓度为5-50mM的还原谷胱甘肽溶液4-8份；
将上述各组分混合均匀，得到可用于减缓单分子荧光漂白现象的除氧试剂；
(3)将所述除氧试剂泵入装有待测单分子荧光物质的单分子荧光检测体系的腔室，进行单分子荧光检测。
6.根据权利要求5所述的应用方法，其特征在于，步骤(1)所述配制抗坏血酸钠溶液是采用pH＝7.1-9.0、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液作溶剂配制而成。
7.根据权利要求5所述的应用方法，其特征在于，步骤(2)中，所述除氧试剂由以下体积份数的各组分组成：pH＝8、浓度为20-400mM的Tris-HCl缓冲液81份，浓度为50-300mM的抗坏血酸钠溶液10份，浓度为20-200mM的酪氨酸溶液4份，浓度为5-50mM的还原谷胱甘肽溶液5份。
8.根据权利要求5所述的应用方法，其特征在于，步骤(3)中，所述待测单分子荧光物质包括单分子荧光染料或单分子荧光染料标记的蛋白质、DNA。
9.根据权利要求8所述的应用方法，其特征在于，所述单分子荧光染料包括花菁染料Cy3、Cy5和Atto 610中的一种或多种。
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