[发明专利]一种水体中孔雀石绿的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明属于成分检测领域，具体涉及一种水体中孔雀石绿的快速检测方法。

背景技术

孔雀石绿(Malachite green,MG)是一种广泛用于印染、纺织、造纸等行业的一种三苯甲烷型的绿色染料，同时因其具有良好的杀菌效果和廉价易得，长期被用于水产养殖业的杀真菌、杀细菌、杀寄生虫的药物。由于其潜在的致癌、致畸、致突变的毒性作用，已被多个国家禁止在养殖业中使用，是水体污染和水产品安全中重点监控的污染物。目前孔雀石绿的主要检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱串联质谱法(LC-MS)等，这些方法虽然具有灵敏度高、准确性好等特点，但是存在检测时间长、预处理复杂、检测成本高，需要专业人员操作等不足，难以满足食品或环境样品的实时、快速检测要求。因此，研究和开发操作简便、快速准确的孔雀石绿残留检测新方法具有非常重要的经济价值和社会价值。

拉曼光谱属于光散射现象中的一种，其频率、峰位变化、峰宽、峰强及偏振与被测物质的分子组成及分子结构有关。表面增强拉曼散射(Surface enhanced Raman Scattering，SERS)已经在界面和表面科学、材料分析、生物、医学、食品安全、环境监测和国家安全等领域得到了广泛应用。SERS技术不但能够提供更丰富的化学分子的结构信息，可实现实时、原位探测，而且灵敏度高、数据处理简单、准确率高，是一种强有力的痕量检测工具。由于其无需样品预处理、操作简便、检测速度快、准确率高、仪器便携等特点，SERS检测在食品安全快速检测中起到了积极的作用。SERS纳米材料的制备一直是SERS技术最核心的关键因子，而且对于扩大SERS的研究范围和应用领域起着重要的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种水体中孔雀石绿的快速检测方法，该检测方法以银裹纳米磁珠作为表面增强拉曼散射(SERS)增强基底，能快速定量检测水体中痕量孔雀石绿。

本发明所提供的检测方法，包括如下步骤：

1)将一系列浓度的孔雀石绿标准样品分别与银裹纳米磁珠混合，使孔雀石绿通过非苯环上的二甲氨基吸附于银裹纳米磁珠表面的金属银上，并利用磁场收集银裹纳米磁珠，留取待用；

2)对步骤1)中收集的银裹纳米磁珠进行表面增强拉曼散射测定，并绘制孔雀石绿浓度与拉曼信号强度之间的标准曲线；

3)取待测样品依次按步骤1)和步骤2)进行处理，测知待测样品的拉曼信号强度，再代入步骤2)的标准曲线中，得知待测样品中孔雀石绿浓度。

上述检测方法中，步骤1)中，所述一系列浓度的孔雀石绿标准样品的浓度范围为10^-3mol/L～10^-14mol/L，其中，两相邻浓度的孔雀石绿标准样品中大浓度为小浓度的10倍。

所述银裹纳米磁珠是以银裹纳米磁珠悬浮水溶液的形式存在，其中，所述银裹纳米磁珠悬浮水溶液中银裹纳米磁珠的浓度为1-3mg/mL，具体可为2mg/mL。

所述孔雀石绿标准样品和所述银裹纳米磁珠悬浮水溶液的体积比为1：(1-3)，具体可为1:2。

所述混合的温度为20-30℃，具体可为25℃，时间为20-40min，具体可为30min。

所述利用磁场收集银裹纳米磁珠，具体可按如下方法：利用磁体收集银裹纳米磁珠富集于容器底部，移去上清液，即可得到银裹纳米磁珠。

此外，为了确保银裹纳米磁珠表面全部为吸附的孔雀石绿分子，可将所述收集的银裹纳米磁珠分散于去离子水中，超声振荡1-2min(具体可为1min)，使残留的孔雀石绿进入去离子水中，接着，再重复收集银裹纳米磁珠—移去上清液—加入去离子水的步骤至少3次。

上述检测方法中，步骤1)中，还包括将收集到的银裹纳米磁珠分散于去离子水中的步骤，使所述收集到的银裹纳米磁珠呈现均匀的悬浮状态，得到收集到的银裹纳米磁珠悬浮液，其中，所述收集到的银裹纳米磁珠悬浮液中银裹纳米磁珠的浓度为0.5-1.5μg/μL，具体为1μg/μL。

所述银裹纳米磁珠具体可为Fe₃O₄@SiO₂@Ag纳米磁珠，所述银裹纳米磁珠的粒径为360～600nm。

所述银裹纳米磁珠具体可按下述相应方法制备得到。

上述检测方法中，步骤2)中，所述表面增强拉曼散射测定的条件如下：激光波长633nm，曝光时间10-20s，积分次数1-5次，激光强度0.5-5mW。