[发明专利]丝胶蛋白神经导管及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种丝胶蛋白神经导管，其是采用丝素缺失型突变品种家蚕的蚕茧作为原料提取丝胶蛋白，并经交联成型后获得的，具体制备方法包括以下步骤：

采用丝素缺失型突变品种家蚕的蚕茧作为原料，将其粉碎，并将粉碎后的蚕茧原料采用紫外线照射至少5min或使用浓度为70～80wt％的乙醇浸泡至少5min进行灭菌，然后使用LiBr或LiCl水溶液进行丝胶蛋白的提取，将提取物制成浓度为0.5～20wt％的丝胶蛋白水溶液；

在所述丝胶蛋白水溶液中加入共价交联剂，混匀后注入模具中成型，得到丝胶蛋白神经导管半成品，所述共价交联剂的使用量为每1毫升丝胶蛋白水溶液加入2～500μL浓度为0.1～50wt％的共价交联剂；

将所述丝胶蛋白神经导管半成品置于-20℃至-190℃下冷冻成型至少4小时；

将冷冻成型后的丝胶蛋白神经导管半成品冷冻干燥，得到所述丝胶蛋白神经导管。

2.根据权利要求1所述的丝胶蛋白神经导管，其内径为1～3mm，管壁厚为0.5～1mm，长度为15～30mm。

3.权利要求1或2所述的丝胶蛋白神经导管的制备方法，其包括以下步骤：

采用丝素缺失型突变品种家蚕的蚕茧作为原料，将其粉碎，并将粉碎后的蚕茧原料采用紫外线照射至少5min或使用浓度为70～80wt％的乙醇浸泡至少5min进行灭菌，然后使用LiBr或LiCl水溶液进行丝胶蛋白的提取，将提取物制成浓度为0.5～20wt％的丝胶蛋白水溶液；

在所述丝胶蛋白水溶液中加入共价交联剂，混匀后注入模具中成型，得到丝胶蛋白神经导管半成品，所述共价交联剂的使用量为每1毫升丝胶蛋白水溶液加入2～500μL浓度为0.1～50wt％的共价交联剂；

将所述丝胶蛋白神经导管半成品置于-20℃至-190℃下冷冻成型至少4小时；

将冷冻成型后的丝胶蛋白神经导管半成品冷冻干燥，得到所述丝胶蛋白神经导管。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，制取所述丝胶蛋白水溶液的方法包括：

1)采用丝素缺失型突变品种家蚕的蚕茧作为原料，将其粉碎并灭菌，在25～50℃，采用浓度为6～8mol/L的LiBr或LiCl水溶液，在25～50℃进行提取处理5～24小时，每克蚕茧碎片采用20～100mL 6～8mol/L的LiBr或LiCl水溶液进行提取；

2)将步骤1)得到的提取物离心，去除不溶性物质，得到澄清溶液；

3)向步骤2)得到的澄清溶液中加入0.5-3mol/L、pH 8.0～11.0的Tris-HCl缓冲液，并在超纯水中进行透析；

4)将步骤3)得到的透析液离心去除沉淀，浓缩得到浓度为0.5～20wt％的丝胶蛋白水溶液。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其中，使所述丝胶蛋白水溶液的浓度为1.5～15.0wt％。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其中，使所述丝胶蛋白水溶液的浓度为1.5～15.0wt％。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述共价交联剂为戊二醛、丙二醛和京尼平中的一种或多种。

8.根据权利要求3-7任一项所述的制备方法，其中，在所述丝胶蛋白水溶液中加入所述共价交联剂，混匀后注入模具，在4～45℃下维持至少5秒使之成型，得到丝胶蛋白神经导管半成品。

9.权利要求1或2所述的丝胶蛋白神经导管在制备神经移植物中的应用。