[发明专利]一种干细胞组培育苗技术

权利要求书

1.一种干细胞组培育苗技术，其特征在于包括以下步骤：

1）采取新生植物，表面灭菌后切开；

2）组织分化，保留形成层；

3）形成层在分离培养基上培养。

2.如权利要求1所述的一种干细胞组培育苗技术，其特征在于：

所述干细胞组培育苗技术为木本植物维管形成层分生：采取新生枝条，表面灭菌后切开；将含有形成层、韧皮部、皮质和表皮的组织轻轻地从木质部剥离；将获得的组织在分离培养基上培养30d后，新生的形成层细胞和其他脱分化细胞因组织现状的差异自然分离—形成层细胞为均一生长的平板状组织，愈伤组织则为不规则的聚集生长物；将获得形成层细胞转移到生长培养基上培养。

3.如权利要求1所述的一种干细胞组培育苗技术，其特征在于：

所述干细胞组培育苗技术为草本植物储藏根的维管形成层：取户外培育、平滑无伤口的草本植物，表面灭菌；将主根削成薄片，再切成长5～7mm，宽5～7mm，高2～5mm，使每片都含有形成层；将制备好的外植体用蔗糖高渗透液处理，使分化的组织—皮层、韧皮部、木质部、髓部等失去活力，仅形成层能保留生命力；将渗透液处理过的的外植体转移到诱导培养基，培养3-7d后，外植体的形成层变成淡黄色；再过7～14d后，淡黄色部分有一圈细胞生长出；将外植体继代到生长培养基，培养10-20d后，即可分离得形成层细胞，所得细胞继续在同样的培养基上培养。

4.如权利要求1所述的一种干细胞组培育苗技术，其特征在于：

所述干细胞组培育苗技术为静止中心：将稻谷剥皮，表面灭菌，干燥至水分完全去除；将干种子种入培养基，25℃下培养5d，使其发芽；种子发芽5-6d后，收集含有静止中心的根组织，去掉根端的根冠，从切口开始截取1mm长作为外植体；将外植体放入诱导培养基，30d后观察到细胞被诱导出：所得静止中心干细胞为白色，均一，且周围环绕着黏性物质(黏原蛋白)，而一般根组织得到的细胞不均一，黄色，无黏性物质，这些差异使干细胞可以和其它细胞自然分离；将分离得到的静止中心干细胞转移到生长培养基。