[发明专利]包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法有效
| 申请号： | 201510423466.7 | 申请日： | 2015-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN105039440B | 公开（公告）日： | 2018-06-08 |
| 发明（设计）人： | 刘晓华;李响敏 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12P7/64 | 分类号： | C12P7/64;C12N11/04;C12R1/245 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菌体 亚麻酸 异构体 正己烷 共轭 离心收集菌体 磷酸盐缓冲液 生物合成 有机介质 透性 反应时间短 干酪乳杆菌 透性化处理 离心收集 可重复 化湿 吐温 洗涤 回收 | ||
1.包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是包括以下步骤：
（1）收集处于对数生长期的干酪乳杆菌（
（2）透性化菌体用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，按每克透性化湿菌体重悬于20mL 50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中计，将透性化湿菌体重悬于磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积百分比0.5-2.0%的吐温-20混合均匀，于4-40℃处理2-6h，离心收集菌体，将菌体冷冻干燥后得到包衣菌体；
（3）按每克包衣菌体加入到600mL正己烷中计，将包衣菌体加入到正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积百分比0.1-0.3%的α-亚麻酸，在4-40℃下反应1-12h；
（4）离心分离包衣菌体，将正己烷溶液进行减压蒸馏，回收正己烷，产物为
步骤（1）所述的透性化处理液为体积百分比0.5-3.0%的曲拉通X-100，5-50μM的α-亚麻酸，20-200mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液。
2.根据权利要求1所述的包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是步骤（1）中所述的透性化处理液为体积百分比1.0-2.0%的曲拉通X-100，15-35μM的α-亚麻酸，30-100mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述的包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是步骤（2）中所述的吐温-20的加入量为菌悬液体积百分比的0.75-1.5%。
4.根据权利要求1所述的包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是步骤（2）中所述的处理温度为4-25℃。
5.根据权利要求1所述的包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是步骤（2）中所述的处理时间为3-5h。
6.根据权利要求1所述的包衣菌体在有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，其特征是步骤（3）中加入正己烷体积百分比0.125-0.25%的α-亚麻酸，在15-30℃下反应2-6h。
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