[发明专利]一种线粒体靶向型pH荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种线粒体靶向型pH荧光探针，所述荧光探针为FDI荧光探针，所述FDI荧光探针的结构式如(I)所示，其特征在于，所述FDI荧光探针的合成方法包括如下步骤：

将荧光素烯醛与2,3,3-三甲基-吲哚，分别加入到无水乙醇中，在氮气保护下加热回流反应7-10小时，反应液冷却后旋干，经硅胶柱层析提纯得到目标产物FDI；所述荧光素烯醛与2,3,3-三甲基-吲哚的摩尔比为1:1；

2.如权利要求1所述一种线粒体靶向型pH荧光探针，其特征在于，硅胶柱层析提纯中的洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:10，硅胶柱为300-400目。

3.如权利要求1所述一种线粒体靶向型pH荧光探针，其特征在于，所述荧光素烯醛的制备方法为：

(1)将荧光素溶于甲醇中，再加入15-冠醚-5和三氯甲烷，恒压滴加质量分数为33％NaOH溶液，再升温至55℃回流反应10h，在0℃将反应液用浓盐酸酸化，pH调至1-2，出现絮状沉淀，过滤得黄色固体，经硅胶柱层析干法上样提纯得到荧光素单醛；

(2)将荧光素单醛、甲酰基亚甲基三苯基磷烷，溶于氯仿，氮气保护，加热50℃，冷凝回流24h得反应液，反应液冷却后，旋干去溶剂，经硅胶柱层析提纯得到荧光素烯醛。

4.如权利要求3所述一种线粒体靶向型pH荧光探针，其特征在于，所述步骤(1)中硅胶柱层析干法上样提纯中的洗脱剂为乙酸乙酯：二氯甲烷＝1：10，硅胶柱为300-400目。

5.如权利要求3所述一种线粒体靶向型pH荧光探针，其特征在于，所述步骤(2)中硅胶柱层析提纯中的洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:9，硅胶柱为300-400目。

6.如权利要求1所述一种线粒体靶向型pH荧光探针在细胞内线粒体的非疾病诊断或治疗目的的荧光显微成像中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述细胞为Hela细胞株、MCF-7细胞株或RAW264.7细胞株。