[发明专利]微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法

权利要求书

1.微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法，其特征在于所采用的技术方案如下：

a.用手术刀将微小体型鞘翅目昆虫头部快速切下，迅速放入置于冰上的灭菌后的离心管内；

b.待离心管内放入所需数量的昆虫头部后，将离心管底部浸入液氮中，浸入时间为15s；

c.然后迅速将离心管放在旋涡震荡器上震荡5～10s，震荡频率为500～3000r/min；

d.重复步骤b与步骤c程序2～8次，随时取出昆虫头部在体视显微镜下观察，使其达到昆虫触角全部脱离而其它组织不脱落；

e.将昆虫触角全部脱落的昆虫头部从离心管内倒出，可看到分离出的昆虫触角都黏附在离心管内壁上；

f.向离心管内加入-20℃预冷的丙酮溶液，将离心管内壁上的昆虫触角全部冲洗出来，置于9cm灭菌滤纸上进行过滤；

g.待丙酮溶液过滤完后，迅速将滤纸上的昆虫触角集中在体视显微镜下镜检，将非昆虫触角的其它虫体组织用尖头镊子分离剔出；

h.将纯净的昆虫触角收集于去RNA酶离心管中，备用提取RNA、DNA、蛋白质等。

2.根据权利要求1所述的微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法，其特征在于：

a.用手术刀将华山松大小蠹头部快速切下，迅速放入置于冰上的15ml灭菌后的离心管内；

b.待收集200个华山松大小蠹头部后将离心管底部浸入液氮中，侵入时间为15s；

c.迅速将离心管放在旋涡震荡器上震荡5s，震荡频率为3000r/min；

d.重复步骤b与步骤c程序，当震荡第4次后在体视显微镜下快速镜检发现触角全部脱落；

e.将华山松大小蠹触角全部脱落的头部从离心管内倒出，可看到分离出的华山松大小蠹触角都黏附在离心管内壁上；

f.向离心管内加入-20℃预冷的丙酮溶液，将管内壁上的昆虫触角全部冲洗出来，置于9cm灭菌滤纸上进行过滤；

g.待丙酮溶液过滤完后，迅速将滤纸上的华山松大小蠹触角集中在体视显微镜下迅速镜检，将非昆虫触角的其它虫体组织用尖头镊子分离剔出；

h.将纯净的华山松大小蠹触角收集于1.5ml去RNA酶离心管中，备用提取RNA。