[发明专利]一类荧光纳米球及其制备方法

权利要求书

1.一种SiO₂@PAM荧光纳米球的制备方法， 所述SiO₂@PAM荧光纳米球以SiO₂为内核，外层为聚丙烯酰胺偶联荧光分子，其粒径为100-200nm，外层厚度为5-20nm；所述荧光分子为罗丹明B，罗丹明X，或荧光素；荧光分子的质量含量为0.1%-3%；

其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备SiO₂纳米小球

以无水乙醇为共溶剂，氨水为催化剂，将超纯水、氨水和无水乙醇至于圆

底烧瓶中，磁力搅拌混合均匀，另将TEOS 与无水乙醇混合物置于烧杯中，搅拌均匀后迅速倒入烧瓶中，室温搅拌 16h，12000rpm 离心 10min，再用 超纯水和乙醇反复洗涤，去掉表面没有聚合的材料，最后悬浮于乙醇中；

（2）制备SiO₂@PAM纳米小球

将5-10mL 10mg/ml的SiO₂纳米小球分散到由1-10mL水、5-30mL乙醇和0.1-1mL26 wt %氨水组成的混合溶液，室温下搅拌均匀，加入10-100μL的3-（异丁烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷，回流搅拌7h-24h，离心洗涤4-5遍，最后溶于超纯水中，制得SiO₂@MPS溶液；

取10-20ml的SiO₂@MPS溶液，加入0.10-0.20g丙烯酰胺，0.05-0.10g亚甲基双丙烯酰胺，10-100μL丙烯酸，在通保护气体的情况下，加入30-60μL的30 wt %的过硫酸铵和20-40μL的四甲基乙二胺，室温搅拌4-6h；离心清洗4-6次，即得羧基功能化的SiO₂@PAM纳米小球溶液；

(3)SiO₂@PAM荧光纳米小球

制备氨基改性的荧光染料:取1-10mg的荧光染料加入到一定量的pH 9~11的缓冲液中，缓慢加入0.2-15μL的乙二胺，避光搅拌过夜，制得氨基改性的荧光染料；

(4)将5-10mL制备的羧基功能化的SiO₂@PAM纳米小球加入到一定量pH 5~7的缓冲液中，加入10倍羧基摩尔量的EDC和NHS，室温活化0.5-2h后加入1-10mL的氨基改性的荧光染料，搅拌2-4h；离心清洗5-8次，透析一天，即制得SiO₂@PAM荧光纳米小球。