[发明专利]一种用于培养人间充质干细胞的无血清培养基在审
申请号: | 201510430188.8 | 申请日: | 2015-07-20 |
公开(公告)号: | CN104962516A | 公开(公告)日: | 2015-10-07 |
发明(设计)人: | 龚伟 | 申请(专利权)人: | 龚伟 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300384 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 培养 人间 干细胞 血清 培养基 | ||
1.一种用于培养人间充质干细胞的无血清培养基,其特征在于以DMEM培养液作为基础培养基,在DMEM培养液中加入有全营养组分:氨基酸、维生素、蛋白营养素、无机盐;调控组分:糖代谢激素、生长因子、抗氧化剂,各成分的用量为在1ml的DMEM培养液中,糖类代谢激素10-20μg、氨基酸120-250μg、生长因子200-500ng、维生素40-100ng、蛋白营养素500-1200ng、抗氧化剂100-180μg、无机盐8-35mg。
2.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于糖类代谢激素以胰岛素为主要成分,辅之以胰岛素反调节激素,胰岛素的用量为12-15μg,胰岛素反调节激素的用量为50-600ng。
3.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于氨基酸至少包含一种或几种必需氨基酸,和一种或几种半必需氨基酸;必需氨基酸包括苏氨12-15μg、亮氨酸24-30μg、异亮氨酸18-22μg、赖氨酸9-14μg、蛋氨酸30-40μg;半必需氨基酸包括甘氨酸8-14μg、精氨酸9-16μg、丝氨酸30-35μg、酪氨酸28-35μg。
4.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于生长因子包括内皮细胞生长因子80-260ng、成纤维细胞生长因子100-150ng、肝细胞生长因子40-75ng。
5.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于维生素包括叶酸20-55ng、d-泛酸钙17-23ng、氯化胆碱3-10ng、维生素B12 3-10ng、肌醇1-5ng。
6.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于蛋白营养素包括重组人转铁蛋白15-40ng、腐胺20-25ng、重组人血清白蛋白500-1100ng。
7.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于抗氧化剂包括谷胱甘肽90-130μg、维生素C 10-13μg、维生素E 10-15μg。
8.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于无机盐包括氯化钙33-40μg、氯化钾70-300μg、氯化钠10-30mg、柠檬酸铁0.8-1μg。
9.根据权利要求1的无血清培养基,其特征在于还加入有pH指示剂,其用量为0.1-0.5mg。
10.一种用于培养人间充质干细胞的无血清悬浮培养基,其特征在于在权利要求1的无血清培养基中加入表面活性剂和/或微载体作为悬浮载体,悬浮载体的用量为0.5-5mg。
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