[发明专利]THBS2作为直肠癌血清标记物的应用及诊断试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及THBS2作为直肠癌血清标记物的应用及诊断试剂盒。

背景技术

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，在全世界范围内，结直肠癌的死亡率高居前三，在中国结直肠癌的发生率呈不断上升之势，死亡率居第五。经过积极外科手术治疗和放化疗，结直肠癌患者5年总体生存率在66%左右。有数据表明，结直肠患者在I期甚至更早得到有效的诊断和治疗的话，生存率能够提高到90%以上。然而目前结直肠癌的早期诊断率只有37%左右，一旦到III期或者IV期才发现治疗，生存率则降低为10%-30%。可见提高结直肠癌的早期诊断率至关重要。目前结肠镜对结直肠癌检查的灵敏度和特异性最高，但由于费用较高、患者痛苦较大和操作要求高等原因降低了患者愿意做该项检查的程度，致使很多患者拖到晚期，一般的影像学检查确诊时患者常常已经处于癌症晚期，对提高患者生存率作用有限。因此，找到特异性和敏感性均佳的肿瘤标记物成了可行的方法。然而结直肠癌的发生发展是多种基因损伤的结果，目前还没找到理想的肿瘤标志物。

理想的肿瘤标志物应符合以下条件：（1）敏感性高；（2）特异性好；（3）肿瘤标志物浓度和肿瘤大小、转移、恶性程度有关，能监测肿瘤治疗效果和肿瘤的复发并预测预后；（4）半衰期短，有效治疗后浓度很快下降，能较快反映体内肿瘤的实际情况；（5）存在于体液，特别是血液中,易于检测。

现在应用于临床的肿瘤标记物大约有如下几种：CA-153，CA19-9，CA-125，AFP，CEA，PAS，Ferritin，CA724，CA242等。通过对临床600多例样本的统计分析，发现只有CEA在诊断结直肠癌时的敏感性在临床应用中能达到50%以上，其余都低于20%。

Thrombospondin-2（THBS2）属于人血小板反应蛋白家族成员之一。近年来研究表明THBS2可在多种组织中表达，并与肿瘤的发生发展密切相关。NaumnikW等研究表明THBS2表达水平与晚期非小细胞肺癌病人的生存时间相关，THBS2水平越高，生存时间越短，大于24.15ng/ml的病人平均生存时间不足9个月。MatosAR等发现THBS2的转录水平可用于区分前列腺癌和良性的前列腺增生。而KochM等的研究则表明CD36可通过THBS2抑制乳腺癌的发展和转移，另外，在卵巢癌和急性淋巴白血病中THBS2发现因甲基化而沉默。然而目前为止尚无明确的大样本数据验证其血清表达水平与肿瘤发生发展之间的相关性，本发明通过检测表明血清THBS2水平诊断结直肠癌的特异性达87.2%，敏感度达65.0%。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种THBS2作为结直肠癌血清标记物的应用及诊断试剂盒的技术方案，来定性或定量检测人血清中的THBS2抗原水平，作为辅助结直肠癌早期诊断的一种手段，大大提高结直肠癌早期诊断的敏感性和特异性。

所述的人血小板反应蛋白THBS2作为检测直肠癌的血清标记物的应用。

所述的人血小板反应蛋白THBS2在制备直肠癌诊断试剂盒中的应用。

所述的人血小板反应蛋白THBS2在制备直肠癌诊断试剂盒中的应用，其特征在于以常规方法制备抗人血小板反应蛋白THBS2的抗体，建立检测人血小板反应蛋白THBS2的定性或定量方法及配套的试剂盒。

所述的人血小板反应蛋白THBS2在制备直肠癌诊断试剂盒中的应用，其特征在于抗人血小板反应蛋白THBS2的抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

所述的一种直肠癌诊断试剂盒，包括固相、位于固相中的抗体、酶标记抗体，其特征在于所述的抗体为抗人血小板反应蛋白THBS2的抗体。

所述的一种直肠癌诊断试剂盒，其特征在于抗人血小板反应蛋白THBS2的抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

本发明为直肠癌的诊断和／或治疗提供一条全新的途径。

本发明的有益效果在于：1.提供的血清生物标志物的特异性为87.2%，敏感性为65.0%，具有较高特异性和敏感性。2.提供一种灵敏、可靠、可操作的方法，定量测定人血清中THBS2抗原水平，有助于辅助早期诊断结直肠癌。

附图说明

图1为实施例中的标准曲线图；

图2为实施例中ROC曲线图；

图3为实施例中THBS2点分布图。

具体实施方式

为了使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按常规实验方法进行。