[发明专利]用于鉴别贡菊和亳菊的反相薄层色谱方法

说明书

技术领域

本发明属中药药材鉴别技术领域，涉及一种用于鉴别贡菊和亳菊的反相薄层色谱方法。

背景技术

菊花为常用中药，也是常用饮品。商品菊花为菊科植物菊ChrysanthemummorifoliumRamat.的干燥头状花序。由于产地和加工方法不同，菊花商品药材又分为贡菊、亳菊、杭菊等，其中贡菊和亳菊均产于安徽省，为常见主流品种。由于商品品种和等级不同，市场销售各种菊花价格相差甚大，而又由于各种菊花商品外观性状差异的鉴别方法不易掌握，通常出现品种混杂、以次充好的现象。为保护广大消费者的利益，打击不法销售现象，研究开发一种用于鉴别贡菊和亳菊的方法例如反相薄层色谱方法，是具有重要意义的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单的方法来鉴别贡菊和亳菊。已经出人意料地发现，使用反相薄层色谱法来鉴别贡菊和亳菊，以木樨草素、山柰酚、金合欢素为指标成分，通过溶剂展开与显色等程序，可以容易地实现贡菊和亳菊的鉴别，达到准确使用药材的目的。本发明基于此发现而得以完成。

为此，本发明的一个方面提供了一种反相薄层色谱法鉴别贡菊和亳菊的方法，其包括以下步骤：

1)分别精密称取木樨草素、山柰酚、金合欢素对照品，加甲醇或乙醇溶液制成每1ml各含1～5mg(例如2～3mg)的溶液，作为对照品溶液；

2)取贡菊和亳菊药材粗粉适量，分别置于具塞锥形瓶中，加溶剂25ml，超声处理10～90分钟，滤过，将滤液在水浴上蒸干，残渣分别加甲醇或乙醇1ml溶解，制得贡菊和亳菊的供试品溶液；

3)用定量毛细管分别吸取上述1)制得的3种对照品溶液和2)制得的2种供试品溶液适量，依次点样于同一反相薄层板W/UV254的同一水平线不同位置上；

4)以甲醇和水、或乙醇和水以一定比例为展开剂，进行展开，展开后取出，晾干；

5)以5％三氯化铝乙醇溶液为显色剂，显色后，加热适当长时间，取出，放凉；

6)在364nm和/或254nm紫外灯光下观察，并比较色谱图中的荧光斑点(365nm紫外光灯下)和/或暗斑(254nm紫外光灯下)，以鉴别贡菊和亳菊；

7)结果判断：

正品的贡菊供试品在与木樨草素对照品相同Rf值位置上，(相对于木樨草素对照品斑点而言，下同)显示较弱的荧光斑点(365nm紫外光灯下)和/或暗斑(254nm紫外光灯下)，在与山柰酚、金合欢素对照品相同Rf值位置上，不显示荧光斑点(365nm紫外光灯下)和/或暗斑(254nm紫外光灯下)；

正品的亳菊供试品在与木樨草素对照品相同Rf值位置上，(相对于木樨草素对照品斑点而言，下同)显示较强的荧光斑点(365nm紫外光灯下)和/或暗斑(254nm紫外光灯下)，在与山柰酚、金合欢素对照品相同Rf值位置上，(相对于山柰酚、金合欢素对照品斑点而言，下同)显示相同的荧光斑点(365nm紫外光灯下)和/或暗斑(254nm紫外光灯下)；

如果标记为贡菊或亳菊的检测药材与上述相应正品药材不吻合，则该检测药材不是正品药材。

根据本发明的方法，所述步骤1)中所述甲醇或乙醇溶液是指将甲醇或乙醇与水以一定比例混合后制成的溶液，其中甲醇与水的体积比可以是10:90～100:0、乙醇与水的体积比可以是10:90～100:0；例如甲醇溶液或乙醇溶液的浓度为10％～100％，例如浓度为50％～90％，例如浓度为60％～90％。根据本发明的方法，所述步骤2)中所述药材粗粉可以是过20～100目筛的粉末(例如50-80目筛)；所述粗粉适量，可以是0.1～0.5g，例如0.2～0.3g；所述溶剂是指将甲醇或乙醇与水以一定比例混合后制成的溶液，其中甲醇与水的体积比可以是10:90～100:0、乙醇与水的体积比可以是10:90～100:0；例如甲醇溶液或乙醇溶液的浓度为10％～100％，例如浓度为50％～90％，例如浓度为60％～90％。

根据本发明的方法，所述步骤3)中所述取对照品溶液或供试品溶液适量，可以是1～10μl，例如1～5μl，例如1～3μl；所述反相薄层板W/UV254，可以是国产或进口的预制反相薄层板；

根据本发明的方法，所述步骤4)中所述甲醇和水、或乙醇和水以一定比例为展开剂，甲醇与水的体积比可以是10:90～100:0、乙醇与水的体积比可以是10:90～100:0，例如甲醇溶液或乙醇溶液的浓度为10％～100％，例如浓度为20％～90％，例如浓度为20％～80％；所述展开，可以是一次展开或二次展开。