[发明专利]一种检测绿原酸的方法及其专用酶联免疫试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测绿原酸的方法及其专用酶联免疫试剂盒。本发明的专用酶联免疫试剂盒所使用的抗绿原酸的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株CGMCC No.10880分泌产生的。通过实验证明：本发明所提供抗绿原酸的单克隆抗体特异性强，对隐绿原酸的交叉反应率为1.926％；对新绿原酸的交叉反应率为4.870％；对异绿原酸A的交叉反应率为17.533％；对异绿原酸B的交叉反应率为0.364％；对异绿原酸C的交叉反应率为0.776％；对咖啡酸的交叉反应率为0.010％。利用该单克隆抗体制备得到的酶联免疫试剂盒可用于定性或定量检测样品中绿原酸，线性检测范围在0.10～1.51ng/mL，具有快速、灵敏的优点。

技术领域

本发明涉及一种检测绿原酸的方法及其专用酶联免疫试剂盒，属于生物技术领域。

背景技术

绿原酸(Chlorogenic acid，CGA)是由咖啡酸和奎宁酸组成的酚酸类化合物，具有抗氧化、抗炎、抑菌杀菌、心肌保护、抗血栓等多种药理活性。绿原酸存在于多种药用植物中，2010版《中国药典》以绿原酸含量作为金银花(Lonicerae japonicae FLOS)、山银花(Lonicerae FLOS)、杜仲叶(Eucommiae FOLIUM)等中药材质量评价指标性成分之一。

目前，绿原酸检测方法有薄层色谱法、高效液相色谱法、液质联用检测法、毛细管电泳检测法等，但上述方法均无法同时满足简单快速、高通量、现场检测的需求。酶联免疫吸附检测法具有操作简便、灵敏度高、通量高、检测快速、成本低廉等特点，在中药材的品质鉴定方面应用广泛。

金银花是常用大宗药材之一，市场需求量大，但由于金银花种质、生境、采收加工、储藏条件等诸多差异，导致金银花药材质量参差不齐，严重影响金银花药用疗效及其他商业产品开发应用，所以建立一种简便、快速、高通量的绿原酸免疫检测方法对金银花等中药材的质量控制具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的第一个目的是提供抗绿原酸的单克隆抗体。

本发明提供的抗绿原酸的单克隆抗体的保藏号为CGMCC No.10880的杂交瘤细胞株分泌的。

本发明的第二个目的是提供一株分泌抗绿原酸的单克隆抗体的杂交瘤细胞株CGA1D7。

本发明提供的分泌抗绿原酸的单克隆抗体的杂交瘤细胞株CGA1D7的保藏号为CGMCC No.10880。

本发明保护保藏号为CGMCC No.10880的杂交瘤细胞株CGA1D7，该杂交瘤细胞株的分类命名为小鼠杂交瘤细胞系，该杂交瘤细胞株已于2015年6月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏号为CGMCC No.10880。

本发明的第三个目的是提供上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株CGA1D7的新用途。

本发明提供了上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株CGA1D7在检测或辅助检测待测样品中绿原酸含量中的应用。

本发明还提供了上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株CGA1D7在制备检测或辅助检测待测样品中绿原酸含量的试剂或试剂盒中的应用。

本发明还提供了上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株CGA1D7在制备检测或辅助检测待测样品中绿原酸含量的胶体金试纸条中的应用。

本发明还提供了上述单克隆抗体或上述杂交瘤细胞株CGA1D7在比较或辅助比较待测样品中绿原酸含量高低中的应用。

本发明的第四个目的是提供一种检测或辅助检测待测样品中绿原酸含量的酶联免疫试剂盒。

本发明提供的检测或辅助检测待测样品中绿原酸含量的酶联免疫试剂盒包括独立包装的上述单克隆抗体。