[发明专利]LECT2多肽、LECT2蛋白在制备动员造血干/祖细胞药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及LECT2蛋白、LECT2多肽的应用，及LECT2蛋白、LECT2多肽中的氨基酸序列。

背景技术

造血干/祖细胞移植经常被用于治疗多种疾病，增加造血干/祖细胞在骨髓的增殖并且动员它们进入血液对于造血干/祖细胞移植非常重要。造血干/祖细胞疗法目前是肿瘤、中风、阿尔兹海默症等许多疾病的重要治疗手段。收集血液中的干细胞可以用于异体干细胞移植或者短暂保存以后用于自体干细胞移植。上述干细胞疗法均需要动员骨髓中的干细胞，使其由骨髓进入到血液中。造血干/祖细胞（HSPC）在骨髓和血液中经历滞留(retention)、动员(mobilization)和归巢(homing) 三种运动。在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)作用下，HSPC将被动员激活增殖，最终由骨髓迁移到血液。这个过程已经被临床上用于收集骨髓造血干/祖细胞用于多种疾病的治疗。目前临床上，仅有G-CSF、GM-CSF和AMD3100等极少数的药物被用于动员HSPC，而其它动员药物在临床试验中多因为强烈的副作用或效果较差而失败，比如SCF可诱发血管性水肿、风疹等疾病。即使G-CSF已经成为最常用的HSPC动员药物，临床使用中也发现存在一定副作用，比如会引起骨痛、重度再生障碍性贫血和中性白细胞减少症。而且5-30%的病人在所有目前临床上使用的动员药物使用之后，仍然无法动员足够的HSPC进入血液。因此临床上急需开发新的HSPC动员药物。

白细胞衍生趋化因子(leukocyte cell-derived chemotaxin 2，LECT2蛋白)是一个多功能的蛋白质，分子量约为16 kDa，含三个分子内二硫键，该分子结构简单，无糖基修饰。LECT2一开始被认为是一种嗜中性粒细胞趋化因子，随着研究的深入，人们发现它还与骨骼和血管生长、肝移植损伤修复、植物毒素、非病原抗原等引起的病理和生理过程有关，如公布号为CN102159238名称为抑制病理性血管发生作用的组合物的中国专利文献，就公开了包括有效量的LECT2蛋白制备成抑制病理性血管发生作用和/或细胞增生性疾病的组合物。

发明内容

本发明首先所要解决的技术问题是提供LECT2多肽在制备促进造血干/祖细胞动员药物中的应用。所述LECT2多肽通过上调骨髓中的造血干/祖细胞，将其动员到血液中，引起血液中造血干/祖细胞数目的增多，并且引起血液中造血干/祖细胞培养产生的集落形成单位(CFU-C)数量的增多。

进一步地，本发明还提供了LECT2多肽在制备促进骨髓造血干/祖细胞数量增加药物中的应用。

所述LECT2多肽包含下列氨基酸序列组成：PWANICAGKSSNEIRTCDRHGCGQYSAQRSQRPHQGVDILCSAGSTVYAPF，可以依据Ovejero等公开的 “Identification of the leukocyte cell-derived chemotaxin 2 as a direct target gene of beta-catenin in the liver” ( Hepatology, 2004年7月、40(1), 167-176 )方法进行制备。所述LECT2蛋白(登录序列号NM_002302)为氨基酸全长序列，也用上述方法制备。可以在动物细胞、低等真核生物或原核生物中重组表达，如在酵母菌中表达得到重组LECT2多肽，或在大肠杆菌或枯草芽孢杆菌等原核生物进行表达得到重组LECT2多肽。此外，还可以采用固相合成的方法合成LECT2多肽。

本发明还提供了LECT2蛋白在制备促进造血干/祖细胞动员药物中的应用。所述LECT2蛋白通过上调骨髓中的造血干/祖细胞，将其动员到血液中，引起血液中造血干/祖细胞数目的增多，并且引起血液中造血干/祖细胞培养产生的集落形成单位(CFU-C)数量的增多。

进一步地，本发明还提供了LECT2蛋白在制备促进骨髓造血干/祖细胞数量增加药物中的应用。

LECT2蛋白、LECT2多肽制备的药物，可以是纯LECT2多肽制剂、LECT2蛋白制剂，也可以是LECT2多肽、LECT2蛋白与药学上可接受的载体组成的各种制剂，如注射剂、口服液、丸剂、片剂、胶囊等，这些药学上可接受的载体可以是：所述载体材料包括填充剂、崩解剂、润湿剂、粘合剂、泡腾剂、表面活性剂、润滑剂、助流剂、矫嗅剂、着色剂以及其他种类的固体制剂的赋形剂。