[发明专利]一种以FMYYSSR-3标记对烟草原料进行鉴定的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学研究领域，具体是一种以FMYYSSR-3标记（即分子标记技术）对烟草原料进行鉴定的方法，由于本方法以烟草物种DNA的特异性作为鉴定依据，因此与传统鉴定方法相比，有更加客观、更加准确、更加可靠的优势。

背景技术

在烟草原料的鉴别检验工作中，多是通过外观判断、评吸等手段进行烟草原料鉴定，个别烟草原料鉴别检验涉及相关的化学成分检测。但就目前来看，部分形态的烟草原料（如烟丝、烟沫等），很难从外观上进行鉴别检验，烟草与其他植物之间、各烟草种类之间也很难完全以化学成分检测及评吸来进行鉴别；而且上述鉴别要求检验人员不仅需要掌握相关的原料特性、化学成分分析方法、感官评吸技术，还需具备烟草原料生产和分级技能，检验人员的培训难度大；另外，烟草原料本身的霉变和不法分子所采取的染色、加香加料等手段，也加大了检验人员进行准确鉴定的难度。

DNA分子标记技术属于分子生物学研究范畴，是从DNA水平区分不同物种甚至是同一物种不同个体之间的选择性标记技术^[1-7]。自上世纪80年代以来，随着聚合酶链式反应（PCR）技术的出现，DNA分子生物学研究发展迅猛，目前DNA分子标记技术已有数十种之多，如限制性片段长度多态性标记（RestrictionFragmentLengthpolymorphism,RFLP）^[8]、随机扩增多态性标记（RandomAmplifiedPolymorphicDNA,RAPD）^[9]、序列特异性扩增区域标记（SequenceCharacterizedAmplifiedRegions,SCAR）^[10]、内含子长度多态性标记（intron-lengthpolymorphism,ILP）^[11]、单核苷酸多态性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）^[12]、简单序列重复标记（SimpleSequenceRepeats,SSR）^[13]等。由于在DNA分子水平，不同物种间甚至是同一物种不同个体之间都能得到很好的区分，因此DNA分子标记技术作为物种分类鉴定的一种手段，已被广泛地应用于属间、种间、品种间的分类鉴定和亲缘关系研究中，几乎可以对所有的生物种类进行分类鉴定^[14-24]，在目前物种鉴定技术中发展最快，也最为热门。表1列出了DNA分子标记技术在各类鉴定中的应用。

表1DNA分子标记技术在各类鉴定中的应用