[发明专利]一种利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法

权利要求书

1.一种利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、土壤样品的采集；

b、土壤样品的预处理；

c、土壤过氧化氢酶活性的测定；

d、根据过氧化氢酶活性大小评价土壤重金属污染程度。

2.如权利要求1所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：步骤a中采集特定区域的土壤样品时，须去除地上部分的植被，采集1～20厘米处的表层土壤，且同一区域至少采集3个生物学重复样品。

3.如权利要求1所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于，步骤b中土壤样品的预处理方法，包括如下步骤：

1)取两个相同容量的具塞三角瓶，向一个具塞三角瓶中加入一定量的土壤样品，另一个具塞三角瓶不加土壤样品作为对照样，向两个具塞三角瓶加入相同量的甲苯并摇匀，置于3～5℃冰箱中25～35min；

2)取出具塞三角瓶，快速向两个具塞三角瓶中加入相同量的3％的H₂O₂水溶液，充分混匀后再置于3～5℃冰箱中1h；

3)再次取出具塞三角瓶，向两个具塞三角瓶中加入相同量的2M的硫酸溶液，混合均匀，分别过滤，得土壤样品滤液和对照样滤液待用。

4.如权利要求3所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于，步骤c中土壤过氧化氢酶活性的测定方法，包括以下步骤：

步骤一，量取相同体积的土壤样品滤液和对照样滤液分别加入两个三角瓶中，向两只三角瓶中分别依次加入相同体积的蒸馏水和相同体积的2M的硫酸溶液，混合均匀，待用；

步骤二，用0.02M的高锰酸钾溶液分别滴定步骤一配制的土壤样品液和对照样品液，滴定至溶液呈淡红色，且30s不褪色，即为反应终点；

步骤三，根据对照样品和土壤样品的滴定差，求出相当于分解的H₂O₂的量所消耗的高锰酸钾的量，高锰酸钾消耗量越大，过氧化氢酶活性越低。

5.如权利要求4所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法， 其特征在于：所述根据土壤过氧化氢酶活性评价土壤重金属污染程度是指根据各位点采集土壤样品中过氧化氢酶的活性来判断该位点的土壤重金属污染状况，土壤样品中过氧化氢酶活性变化越显著，该位点的土壤中重金属污染越严重。

6.如权利要求5所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：所述土壤过氧化氢酶的活性以每克土壤消耗的0.1M高锰酸钾溶液的体积数表示，所述高锰酸钾溶液体积以毫升计算。

7.如权利要求3所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：步骤1中所述甲苯的加入量为土壤质量的8.7％。

8.如权利要求3所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：步骤2中所述H₂O₂的加入量为土壤质量的15％。

9.如权利要求3所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：步骤3中所述硫酸的加入量为土壤质量的98％。

10.权利要求4所述的利用土壤过氧化氢酶表征土壤重金属污染的方法，其特征在于：步骤一中所述滤液、蒸馏水和2M的硫酸溶液的体积比为1_∶5_∶5。