[发明专利]氟苯尼考快速检测试剂盒及其制备、使用方法

权利要求书

1.氟苯尼考快速检测试剂盒，其特殊之处在于包括自下而上排列的支撑体、用于快速吸收检测试剂的吸水层(3)、由硝酸纤维素膜制成的检测层(2)、带通孔(1)的盖板(4)，保藏号为：CCTCC—C201575杂交瘤细胞FFA-C所分泌的、胶体金标记的抗氟苯尼考胺单克隆抗体C(简称：金标单抗C)；A液：含1-5％分子量为20000的聚乙二醇(PEG20000)、0.05-0.25％吐温-20的0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)；B液：含0.01-0.25％吐温-20的0.01mol/L磷酸盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述氟苯尼考快速检测试剂盒，其特征在于：所述的金标单抗C：是由碱水解法制备氟苯尼考胺(FFA)半抗原与牛血清白蛋白(BSA)通过戊二醛法偶联合成的氟苯尼考胺-牛血清白蛋白(FFA-BSA)完全抗原，将其作为免疫原而制备的抗氟苯尼考胺单克隆抗体，经胶体金标记后而致。

3.根据权利要求1所述氟苯尼考快速检测试剂盒，其特征在于：所述的金标单抗C，其制备方法如下：

(1)、制备胶体金溶液，制得的胶体金的颗粒大小为10-20nm；

(2)、将单克隆抗体C(0.5-1g/L抗体蛋白)，按150-500μl加入到上述的100ml胶体金溶液中，慢搅混匀；

(3)、向混合溶液中加入PEG20000，使其终浓度为1-5％，静置过夜；

(4)、离心8000-10000转/分，1-1.5小时，弃上清；

(5)、取离心沉淀，用含有1-5％PEG20000、0.05-0.25％吐温-20、0.02％叠氮化钠的0.01mol/L磷酸盐缓冲液悬起，制成金标单抗C。

4.按照权利要求3所述的氟苯尼考快速检测试剂盒，其特征在于步骤(1)中所述胶体金溶液的制备方法为按一定的配比将氯金酸与柠檬酸三钠混合并加热制备成胶体金溶液。

5.按照权利要求3所述的氟苯尼考快速检测试剂盒，其特征在于步骤2)中单克隆抗体C与胶体金溶液慢搅混匀30-60min。

6.氟苯尼考快速检测试剂盒的使用方法，其特征在于包括以下步骤：将待测样品滴加到硝酸纤维素膜上，晾干，然后加A液渗入，加金标单抗C渗入，加B 液渗入，5-10分钟，便可在硝酸纤维素膜上显示检测结果。

7.按照权利要求6所述的氟苯尼考快速检测试剂盒的使用方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取待测溶液5μl，点在盖板4的通孔1中的硝酸纤维素膜上，晾干；

(2)在其上加含1-5％PEG20000、0.05-0.25％吐温-20的0.01mol/LPBS的A液100μl渗入，进行封闭；

(3)加入100μl金标单抗C，渗入；

(4)加入含0.01-0.25％吐温-20的0.01mol/LPBS的B液100μl渗入；

(5)结果显示：硝酸纤维素膜上出现红色斑点为阳性，表示检测到有氟苯尼考或者氟苯尼考胺残留，无红色斑点为阴性，表示检测不到氟苯尼考或者氟苯尼考胺，或者是两者浓度低于10ug/ml。