[发明专利]一种基因工程好氧硝化细菌及其构建方法和在处理高浓度氨氮污水中的应用

权利要求书

1.一种基因工程好氧硝化细菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化菌是Biodeammonianitrogen工程菌，拉丁文学名为Brevibacillus reuszeri，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CMGCC No.10254。

2.根据权利要求1所述的基因工程好氧硝化细菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化细菌中转化的外源基因的核苷酸序列如序列编号1和2所示。

3.根据权利要求1或2所述的基因工程好氧硝化细菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化细菌的氨单加氧酶基因和羟胺氧化酶的氨基酸序列如序列编号3和4所示。

4.根据权利要求3所述的基因工程好氧硝化细菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化细菌的氨单加氧酶基因前带有分泌型信号肽，其中信号肽的氨基酸序列如编号5所示。

5.权利要求1至4任一所述的基因工程好氧硝化细菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)利用细菌分离技术分离具有氨氮去除效果的硝化细菌基因组；

(2)利用PCR技术克隆氨单加氧酶基因和羟胺氧化酶，与pSIM6载体连接后重组至步骤(1)的好氧硝化细菌基因组的特定位点中；

(3)利用基因工程技术从步骤(2)的产物中筛选出表达氨单加氧酶和羟胺氧化酶基因的好氧硝化细菌；

(4)将步骤(3)的产物在高浓度氨氮条件下驯化，得到具有处理高浓度氨氮污水能力的基因工程好氧硝化细菌；

(5)利用发酵技术将步骤(4)所述具有处理高浓度氨氮污水能力的基因工程硝化细菌进行扩增，得到所述基因工程好氧硝化细菌。

6.权利要求1至4任一所述的基因工程好氧硝化细菌的应用，其特征在于，将膜生物反应系统与所述基因工程好氧硝化细菌联合，在高浓度氨氮条件下，有效去除污水中的高浓度氨氮；

所述膜生物反应系统为流动的需氧膜生物反应系统，膜的材质为树脂；

所述高浓度氨氮在所述污水中的含量是3000～6000mg/L。

7.根据权利要求6所述的基因工程好氧硝化细菌的应用，其特征在于，所述污水中COD的去除率为98.44～99.84％。

8.根据权利要求6所述的基因工程好氧硝化细菌的应用，其特征在于，所述污水中氨氮去除率为98.86～99.94％。

9.根据权利要求6～8任一所述的基因工程好氧硝化细菌的应用，其特征在于，所述污水包括生活污水、工业废水、垃圾渗滤液以及高浓度氨氮废水。