[发明专利]Skp1癌蛋白及其靶向药物在肿瘤治疗中的应用

说明书

Skp1癌蛋白及其靶向药物在肿瘤治疗中的应用。用于制备肿瘤靶向药物的方法包括：筛选能够有效降低Skp1肿瘤蛋白高表达的化合物；以及利用所述化合物制备相应的肿瘤靶向药物。根据本发明的肿瘤靶向药物通过结合Skp1抑制SCF E3连接酶活性，能够抑制肿瘤细胞增殖及细胞周期从而达到抗肿瘤效果。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及公开一种新型癌蛋白Skp1(S-phase kinase-associated protein 1,中文名S期激酶相关蛋白1)及其靶向药物，更具体的涉及能靶向Skp1的化合物(Evodiamine，Liriodenine,6-O-angeloylplenolind等)即以下所述式I化合物)在治疗肿瘤性疾病中的应用。

背景技术

肿瘤是威胁人类健康的头号杀手。2012年世界范围内约新增1410万癌症病例，共有820万癌症死亡病例和3260万癌症患者(5年内诊断)，并且这些数字仍在持续增长中。随着现代医学的发展，人们逐渐认识到肿瘤的形成、发展是由于癌基因突变或者过表达造成的，由此发现促进癌症发生发展的癌蛋白并开发相应的小分子靶向药物，在肿瘤治疗中具有关键作用。

目前靶向治疗药物在肿瘤的治疗中已取得显著的效果。例如，吉非替尼和厄洛替尼是靶向EGFR(表皮生长因子受体)的小分子化合物，可以有效抑制EGFR的磷酸化，已成为肺癌临床治疗的一线药物；STI-571(格列卫)是靶向Bcr-Abl的酪氨酸激酶竞争性抑制剂，目前已经成为治疗慢性髓样白血病(CML)病人的一线用药。但这些激酶抑制剂在治疗过程中会由于激酶蛋白突变而出现耐药，导致治疗失败。因此，迫切需要发现新的治疗靶点并开发新的靶向治疗药物以改善患者预后。

Skp1-Cul1-F-盒蛋白(SCF)复合体在蛋白质的泛素化修饰和降解中发挥重要作用。SCF复合体由Skp1、Cullin1、F-盒蛋白及Rbx1四部分组成，其中Cullin1、多种F-box蛋白、Rbx1已经发现在肺癌等多种癌症中过表达。由于F-box蛋白负责特异底物的识别，其在癌症发生发展中的功能以及特异靶向药物研究也最为广泛。目前研究最为清楚的F-box蛋白包括Skp2、Fbxw7、β-TrCP等。Skp2与β-TrCP在许多肿瘤组织中高表达，而且与肿瘤的转移以及预后密切相关，而Fbxw7具有一定的抑癌作用。NIPA也属于F-box蛋白，可以调控cyclinB1的降解参与细胞周期有丝分裂进程的调控，但其在肿瘤中的作用尚不清楚。研究还发现，特异性靶向Skp2的抑制剂对一些肿瘤细胞具有细胞毒作用，但迄今没有报道Skp1能否做癌症的治疗靶点。

发明内容

发明人首次使用免疫印迹技术(Western blot)，对56例病人的癌及癌旁正常组织进行了Skp1表达检测，结果发现，Skp1蛋白在这些肺癌病人肿瘤组织中的表达显著高于其对应的癌旁正常组织，高表达率为33/56(58.9％)；用免疫组化技术对这些标本进行检测，验证了Western blot检测的结果。进一步分析发现，Skp1在肺癌中的表达水平与病人的生存期成负相关，Skp1高表达患者的生存期显著短于Skp1低表达的病人。

进一步，发明人利用高通量分子对接计算模拟方法筛选靶向Skp1的小分子化合物，发现30个可以与Skp1结合而影响其功能的抑制剂，并研究了其中3个与Skp1结合能量值较高的小分子化合物的抗癌作用及分子机理。发明人发现，3个代表性的化合物吴茱萸碱(Evodiamine)、鹅掌秋碱(Liriodenine),6-氧-安杰莱普诺啉(6-O-angeloylplenolin，简称6-OAP)通过结合Skp1、影响Skp1与F-box蛋白的相互作用，显示显著的抗肿瘤作用。这3个化合物可以有效降低F-box蛋白稳定性；上述F-box蛋白包括但不限于Skp2、NIPA等F-box蛋白。

一方面，本发明提供了Skp1作为一种新的癌蛋白与肿瘤病人的预后显著负相关的分子标记。其中，所述肿瘤为包括但不限于肺癌、多发性骨髓瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、肝癌、食道癌、胃癌、结肠癌、黑色素瘤、白血病、淋巴瘤、直肠癌、脑瘤、皮肤癌。