[发明专利]mRNA-DC肺癌治疗性疫苗及其制备方法和CTL细胞有效
申请号: | 201510447843.0 | 申请日: | 2015-07-27 |
公开(公告)号: | CN105031633A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 曾宪卓;鲁菲 | 申请(专利权)人: | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61P35/00;C12N5/0783 |
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地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | mrna dc 肺癌 治疗 疫苗 及其 制备 方法 ctl 细胞 | ||
1.一种mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
获取肺癌干细胞的mRNA;
将所述mRNA转染至DC中;
将转染有所述mRNA的DC进行体外培养。
2.如权利要求1所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,获取所述肺癌干细胞的mRNA步骤之后、将所述mRNA转染至DC中步骤之前,还包括:
将所述肺癌干细胞的mRNA分子上的尿嘧啶修饰为1-甲基假尿嘧啶。
3.如权利要求1或2所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,将所述mRNA转染至DC中的步骤中,
按所述mRNA转染量与DC细胞个数量比为1x10-5~1x10-4μg/个进行转染。
4.如权利要求1或2所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,所述转染为脉冲电击转染。
5.如权利要求4所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,所述脉冲电击转染过程中电压为700~800V;
和/或,所述脉冲电击转染过程中脉冲时程200~250μs。
6.如权利要求1或2所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法,其特征在于,将转染有所述mRNA的DC进行体外培养步骤中,采用的培养基为含8~12%胎牛血清的RPMI-1640培养基。
7.一种根据权利要求1至6任一项所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗的制备方法制备的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗。
8.一种通过权利要求7所述的mRNA-DC肺癌治疗性疫苗与T淋巴细胞进行共培养获得的CTL细胞。
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