[发明专利]一种制备γ-癸内酯的方法有效
申请号: | 201510451261.X | 申请日: | 2015-07-28 |
公开(公告)号: | CN105002229B | 公开(公告)日: | 2018-08-28 |
发明(设计)人: | 荣绍丰;杨树林;李茜茜;蔡宝国;管世敏;王敬文;周月 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术学院 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 吴宝根 |
地址: | 200235 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 癸内酯 制备 转化培养基 酵母菌 内酯化合物 种子培养液 蓖麻油酸 产物生成 发酵周期 生物转化 发酵液 累积量 一次性 底物 降解 开环 肉碱 酵母 菌种 接种 转化 | ||
1.一种制备γ-癸内酯的方法,其特征在于:以酵母CICC32859为菌种制成种子培养液,然后接种于转化培养基,以蓖麻油酸为底物进行生物转化制备γ-癸内酯,在生物转化过程中向发酵液中添加γ-内酯化合物,所述的γ-内酯化合物为γ-己内酯或者γ-辛内酯,添加到发酵液中的γ-内酯化合物的含量为0.01~0.5 g/L。
2.根据权利要求1所述的一种制备γ-癸内酯的方法,其特征在于:所述的制备方法包括如下步骤:
(1)一个选取菌种的步骤,以酵母CICC32859为菌种;
(2)一个斜面培养的步骤,将酵母CICC32859接种于斜面培养基上,20~35℃培养24~36H;所述的斜面培养基的配方为:葡萄糖10 g/L,氯化钠4 g/L,氯化钙5 g/L,酵母膏12 g/L,蛋白胨10 g/L,琼脂20 g/L,pH为 7;
(3)一个配制种子液的步骤,将步骤(2)所得的菌株,接种到种子培养基中,在20~35℃条件下,150~250 r/min摇床培养20~24H,得到成熟的种子培养液;所述的种子培养基的配方为:葡萄糖20 g/L,磷酸氢二铵2 g/L,磷酸氢二钾5 g/L,氯化钠5 g/L,酵母膏20 g/L,蛋白胨5 g/L,pH 为7;
(4)一个转化培养的步骤,将步骤(3)获得的成熟种子液,按接种量10~20%接种到含有L-肉碱的转化培养基,所述的转化培养基的配方为:蓖麻油酸10~40 g/L,L-肉碱0.01~0.5g/L,葡萄糖1~20 g/L,氯化钠1~10 g/L,磷酸氢二钾0.5~10 g/L,七水硫酸镁3~15 g/L,磷酸二氢铵0.5~15 g/L,酵母膏1~20 g/L,吐温-80 0.5~10 g/L,pH为 5.5~7.5,以蓖麻油酸为底物,在转速为150~250 r/min,温度为25~35℃的条件下转化培养36~60H,然后无菌条件下添加γ-内酯化合物,所述的γ-内酯化合物为γ-己内酯或者γ-辛内酯,所述的γ-内酯化合物的添加量为0.01~0.5 g/L,在转速为150~250 r/min,温度为25~35℃的条件下继续培养12~24H,转化培养结束,获得含有γ-癸内酯的发酵液。
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