[发明专利]一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系及其制备方法有效
申请号: | 201510452707.0 | 申请日: | 2015-07-28 |
公开(公告)号: | CN104984349B | 公开(公告)日: | 2017-05-17 |
发明(设计)人: | 张小娟;郝凌云;田湘萍;胡小红;朱星群;马俊杰 | 申请(专利权)人: | 金陵科技学院 |
主分类号: | A61K49/00 | 分类号: | A61K49/00;A61K47/04;A61K31/704;A61P35/00 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 高玲玲 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 负载 阿霉素 石墨 量子 点载药 体系 及其 制备 方法 | ||
1.一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:水热法制备石墨烯量子点;
利用有机化合物芘在热浓硝酸条件下的硝化作用,稀释过滤除酸后,得到黄色的1,3,6-三硝基芘;利用配制的水合肼和氨水修饰改性;通过超声处理和高压反应釜加热合成水溶性石墨量子点产物GQDs;最后过滤,在真空条件下加热干燥,得到纯化的绿色石墨烯量子点GQDs;
步骤2:将表阿霉素和石墨烯量子点水溶液分别添加到PH=7.4的PBS磷酸缓冲溶液中,将混合液超声分散,混合均匀,在黑暗中不断搅拌,振荡12~24h,获得载有表阿霉素的石墨烯量子点溶液;将此溶液离心,取沉淀物进行真空干燥,干燥后得到石墨烯量子点载药体系,备用;其中:表阿霉素在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为1mg:10ml;石墨烯量子点在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为1mg:10ml;所得到的石墨烯量子点载药体系中,表阿霉素:石墨烯量子点质量比1:0.5~1:2;
步骤3:将石墨烯量子点载药体系进行药物缓释实验;
称取石墨烯量子点载药体系放入适量去离子水中,平均分成两等分,将两份混合液分别置于pH=5.5和pH=7.4的磷酸缓冲溶液中,进行缓释实验;将溶液放在全温度振荡培养箱中,每隔一定时间用移液枪量取样品测定药物释放量,并且补加磷酸缓冲溶液;表阿霉素的浓度为0.005~0.02mg/ml,载药体系的浓度为0.2~1mg/ml;
步骤4:将石墨烯量子点载药体系与宫颈癌Hela细胞共培育,用MTT法检测石墨烯量子点载药体系细胞毒性;
在装有石墨烯量子点载药体系的EP管中,加入75%乙醇消毒,备用;将对数期生长的Hela细胞接种于96孔板,利用DMEM高糖完全培养基进行培养;培养24h后,分别加入不同浓度的石墨烯量子点载药体系;同时设置只加入DMEM高糖完全培养基作为对照组,未接种细胞作为空白组,每组设置6个复孔,分别继续培养24h,每孔加入MTT溶液,培养箱内继续培养4h后,弃去孔内的培养基,然后每孔加入二甲基亚砜DMSO,置摇床避光低速振荡,使结晶物充分溶解;利用酶标仪在490nm波长下测定吸光值OD。
2.根据权利要求1所述的一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系的制备方法,其特征在于:步骤2中,表阿霉素和石墨烯量子点的质量比为1:1。
3.一种按照权利要求1或2的制备方法所得到的负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系。
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