[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于植物病害生物防治技术领域，特别是涉及一种解淀粉芽孢杆菌及其应用。

背景技术

西瓜枯萎病是一种由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp niveum FON)引起的维管束土传病害，是西瓜产业中最普遍、危害最严重的病害之一，一般发病率为10％-30％，严重的达80％-90％，重茬地甚至造成绝产。病原菌从土壤根系侵入，引起维管束变褐坏死，导致瓜秧枯死，其厚垣孢子在土壤中可存活10年之久，严重影响西瓜的种植。目前，对该病害尚无有效的防治方法，传统的轮作虽在一定程度上能减轻病害发生，但随着市场对西瓜需求量的增长，西瓜种植面积逐年扩大，轮作防病措施难以实施。化学防治虽然具有一定的防治效果，但是病原菌对化学药剂的抗性逐年增强，药剂用量不断提高。化学药剂的长期大量使用，造成自然生态环境日益严重的污染。研究表明，在植物体内存在大量的益生菌，已在多种植物体内分离筛选到防病效果明显的内生细菌，有些内生细菌还具有促生、固氮等生物功能，是植物病害防治的重要资源，尤其对化学药剂难以控制的土传病害、维管束病害及系统性病害发挥其独特的优势。因此，寻找防治西瓜枯萎病的拮抗微生物具有重要意义。

利用生防菌株防治植物病害在国内外均有报道，至今美国已有4种芽孢杆菌制备的生防菌剂获得了生产许可证；经检索，申请者在现有的专利和非专利文献中检索到一些关于解淀粉芽孢杆菌的文献报道和专利。例如，专利申请号为2013100328384公开了“一种促生抑菌解淀粉芽孢杆菌、调理剂制备方法及应用”，报道多粘类解淀粉芽孢杆菌Pb-4对番茄等作物有明显的促生和抑菌防病作用。专利申请号为201210342838X公开了“解淀粉芽孢杆菌Ba168及其发酵培养方法和应用”，利用解淀粉芽孢杆菌Ba168制备菌剂，对尖孢镰刀菌引起的白术根腐病、西洋参根腐病和三七根腐病等根腐病害具有很好的防治作用。专利申请号为2014100362727公开了“解淀粉芽孢杆菌噻枯唑复配可湿性杀菌粉剂及其应用”，利用解淀粉芽孢杆菌和噻枯唑复配可湿性杀菌粉剂，用于防治水稻细菌性条斑病和水稻白叶枯病。但目前并没有对西瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌、核桃根腐病菌等重要植物病原菌有拮抗作用的解淀粉芽孢杆菌的报道。

发明内容

为改进现有防治技术的不足，本发明的目的在于提供一种解淀粉芽孢杆菌及其应用，该解淀粉芽孢杆菌对西瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌、核桃根腐病菌等多种病原菌具有显著的拮抗作用。

本发明第一方面提供了一种解淀粉芽孢杆菌，其于2015年5月15日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2015299，命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)XK-2。

解淀粉芽孢杆菌XK-2的菌学特性：

a、形态特征：XK-2为革兰氏阳性菌，呈杆状，芽孢椭圆，在LB平板上形成的菌落成圆形，边齐，稍隆起，湿润，有光泽，乳白色，半透明。

b、生理生化特征：水解淀粉，周生鞭毛，氧化酶阴性，接触酶阳性。

解淀粉芽孢杆菌XK-2的16S rDNA序列如序列表SEQ ID No.1所示，与Genbank上已报道序列进行比对，最终确定菌株XK-2为解淀粉芽孢杆菌。

本发明第二方面提供了解淀粉芽孢杆菌XK-2在抑制西瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌、核桃根腐病菌中的应用。

本发明第三方面提供了解淀粉芽孢杆菌XK-2的筛选方法，具体步骤包括：

(1)从西瓜植株的根部中分离芽孢杆菌；

(2)用平板对峙法从步骤(1)分离的芽孢杆菌中筛选出对西瓜枯萎病菌有抑菌作用的菌株。

本发明第四方面提供了一种解淀粉芽孢杆菌XK-2菌剂，所述菌剂为解淀粉芽孢杆菌XK-2经活化、种子培养、发酵后得到的菌剂。

本发明的有益效果是：(1)解淀粉芽孢杆菌XK-2是一株西瓜内生菌株，对人、畜、农作物安全，对环境友好。

(2)本发明的解淀粉芽孢杆菌XK-2具有较广的抑菌谱，对常见的土传病原菌，西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、核桃根腐病菌(Fusarium solani)等菌丝生长均具有较好的抑制效果，其中对西瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌的抑菌率达80％以上。