[发明专利]一种犬瘟热、细小病毒病二联活疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种犬瘟热、细小病毒病二联活疫苗及其制备方法。该二联活疫苗包含微生物保藏号CGMCC No.10980的犬瘟热病毒弱毒疫苗株以及微生物保藏号是CGMCC No.7408的犬细小病毒弱毒疫苗株。本发明采用分离自中国病犬的野毒并经过驯化致弱的犬瘟热病毒、犬细小病毒为对象，一起配制二联苗，并加入冻干保护剂制成。该二联活疫苗安全性可靠、免疫效果好、针对性强，适合中国病犬疾病的预防，可用于预防犬瘟热和犬细小病毒病。

技术领域

本发明涉及兽用二联活疫苗，尤其涉及犬瘟热和犬细小病毒病二联活疫苗及其制备方法，属于兽用二联疫苗领域。

背景技术

犬瘟热和犬细小病毒病是当前对我国养犬业危害严重的2种烈性传染病。

犬瘟热(canine distemper，CD)是由犬瘟热病毒(canine distemper virus，CDV)引起的一种高度接触性传染病，临床症状多样，容易继发其他细菌、病毒的混合感染和二次感染，死亡率可高达80％，患病动物在康复后还易留有麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。该病自1926年被发现呈世界性分布，危害我国养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业，引起大批犬、貂、狐等动物发病，经济损失惨重。近年来不断发现包括大熊猫、小熊猫以及狮、虎、豹等食肉目所有8个科、偶蹄目猪科、灵长目的猴属和鳍足目海豹等多种动物均有CD自然发病的报道。另外，人也已证实在患Pagets疾病的病人组织中检出CDV核酸。这些表明，CDV的感染范围在不断地扩大，生态学内容在不断地丰富。

犬细小病毒病(canine parovirus，CP)是由犬细小病毒(Canine Parovirus，CPV)感染幼犬引起的一种急性传染病，以剧烈的呕吐、出血性肠炎、白细胞显著减少以及心肌炎为主要特征，2～4月龄幼犬易感性最强。我国自1982年证实存在犬细小病毒感染以来，在东北、华东和西南等地区的军犬、警犬、实验犬等犬群和狐狸等毛皮动物中广泛传播。由于CPV-2不断进行抗原漂移，现已分离获得CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c等多个抗原型流行毒株。近年来，随着CPV的不断变异，CPV宿主范围也在不断扩大，除感染犬、狐狸、狼等犬科动物外，还感染猫、豹、熊、虎等其它多种动物。该病发病急，病程短，传染性强，死亡率高，其发病率达50％～100％，死亡率为10％～50％，是对我国养犬业和经济动物养殖业危害极大的病毒性传染病之一，可造成严重的经济损失。

在1923年就诞生了首份犬瘟热组织灭活疫苗。Puntoni将CDV感染患有脑炎的犬脑组织通过福尔马林灭活制作成灭活组织疫苗，但CDV灭活全病毒疫苗免疫保护有限的，不能完全预防强毒感染，但是与对照相比能激活机体免疫反应抑制临床症状发展。1950年代CDV弱毒活病毒疫苗成功研制并迅速被广泛使用，极大降低了CD的发病率。常规的病毒弱化是将病毒在细胞中连续传代多次后实现的，如适应鸡胚内繁殖的Lederle株和Onderstepoort株及犬肾细胞适应株Rockborn。目前犬细小病毒疫苗主要有弱毒苗，Pfizer公司犬细小病毒病活疫苗，国内犬狂犬病、犬瘟热、副流感、腺病毒和细小病毒病五联活疫苗

Intervet公司犬瘟热、细小病毒病二联活疫苗，犬瘟热、传染性肝炎、细小病毒病、副流感四联活疫苗；Merial公司犬瘟热、腺病毒病、细小病毒病、副流感病毒2型呼吸道感染四联活疫苗-犬钩端螺旋体病、黄疸出血钩端螺旋体病二联灭活疫苗；Pfizer公司犬细小病毒病活疫苗(商品名：)，犬瘟热、腺病毒2型、副流感和细小病毒病四联活疫苗(5)和犬瘟热、腺病毒2型、副流感、细小病毒病四联活疫苗-犬钩端螺旋体(犬型、黄疸出血型)二价活疫苗-犬冠状病毒病(灭活)疫苗；Fort Dodge的犬瘟热、腺病毒2型、细小病毒病、副流感四联活疫苗-犬冠状病毒病灭活疫苗以及国内吉林五星和杨凌均为犬狂犬病、犬瘟热、副流感、腺病毒和细小病毒病五联活疫苗等9个产品。

据不完全统计，犬瘟热和犬细小病毒病联合感染率约为10％，而现有疫苗毒株历史久远，保护率不高，毒株的免疫原性不强。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种犬瘟热、细小病毒病二联活疫苗及其制备方法。