[发明专利]一种N-乙酰氨基葡萄糖的发酵生产方法

权利要求书

1.一种N-乙酰氨基葡萄糖的发酵生产方法，其特征在于，发酵过程中，当发酵液的残糖含量降至0.5g/L以下时，按照5～8g/L·h的流加速率向发酵液中流加葡萄糖溶液，当发酵液的OD660nm＝28～31时，加入IPTG进行诱导，再按照0.5～0.8g/L·h的流加速率向发酵液中流加尿素溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述尿素溶液的流加速率与葡萄糖溶液的流加速率之比为1:10。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述IPTG的加入量为0.03mM。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖溶液的质量浓度为55％。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述尿素溶液的质量浓度为15％。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)种子培养：

配制种子培养基，调节pH至7.3，向种子培养基中通饱和蒸汽至121℃，保温30min，设定种子培养条件：温度37℃，罐压0.05mpa，通风比1:0.5，转速300rpm，pH6.8～7.0；接入产N-乙酰氨基葡萄糖大肠杆菌进行培养，当种子OD660nm＝3.5～5范围区间时，作为种子成熟标准；

(2)发酵培养：

配制发酵培养基，121℃，灭菌30min，降温后设定发酵培养条件：温度37℃，罐压0.03～0.05mpa，通风比1:0.5～1:1，转速300～500rpm，pH 6.9～7.0；将成熟的N-乙酰氨基葡萄糖种子液按照10％接种量接种到发酵罐进行培养，控制溶氧30～40％；

当发酵液的残糖含量降至0.5g/L以下时，按照5～8g/L·h的流加速率向发酵液中流加葡萄糖溶液，当发酵液的OD660nm＝28～31时，加入IPTG进行诱导，再按照0.5～0.8g/L·h的流加速率向发酵液中流加尿素溶液；培养52～56小时。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述种子培养基为：葡萄糖15g/L，磷酸氢二钾11g/L，磷酸二氢钾16g/L，酵母浸粉1g/L，苏氨酸0.2g/L，蛋氨酸0.15g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸铵5g/L，硫酸锰0.013mg/L，硫酸铁0.024mg/L，硫酸锌0.047mg/L，氯化钴0.01mg/L。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基为：葡萄糖5g/L，磷酸氢二钾16g/L，磷酸二氢钾10g/L，酵母浸粉0.3g/L，酵母膏0.1g/L，苏氨酸0.1g/L，蛋氨酸0.15g/L，硫酸镁0.25g/L，硫酸铵3g/L，氯化钾0.1g/L，硫酸锰0.015mg/L，硫酸铁0.35mg/L，硫酸锌0.41mg/L，氯化钴0.02mg/L。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，流加尿素溶液后，培养54小时。