[发明专利]一种利用基因操作提高球孢白僵菌分生孢子产量和毒力的方法

权利要求书

1.一种提高球孢白僵菌分生孢子产量和毒力的方法，其特征在于通过删除球孢白僵菌Pmt1基因编码第311-427位氨基酸的核苷酸序列，并保留完整的PMT结构域，获得球孢白僵菌突变菌株，所述球孢白僵菌突变菌株具有提高的分生孢子产量和毒力。

2.权利要求1所述的方法，其中通过同源重组删除球孢白僵菌Pmt1基因编码第311-427位氨基酸的核苷酸序列，保留包括起始密码ATG在内的完整的PMT活性结构域，获得Pmt1部分序列破坏的突变体，所述突变体中PMT结构域编码区正常转录。

3.权利要求1或2所述的方法，其中所述删除球孢白僵菌Pmt1基因编码第311-427位氨基酸的核苷酸序列是以除草剂抗性基因bar置换Pmt1基因的MIR结构域部分编码区，构建同源重组表达载体。

4.制备球孢白僵菌突变菌株的方法，包括下述步骤：

1)以基因工程方法删除球孢白僵菌Pmt1基因编码第311-427位氨基酸的核苷酸序列，获得重组表达载体；

2)将步骤1)获得的重组表达载体转入球孢白僵菌野生型菌株，删除球孢白僵菌Pmt1基因中PMT活性结构域下游的编码第311-427位氨基酸的核苷酸序列，获得球孢白僵菌突变菌株，所述球孢白僵菌突变菌株具有提高的分生孢子产量和毒力。

5.一种球孢白僵菌突变株，其特征在于用权利要求4所述的方法制备。

6.一种真菌杀虫剂，含有权利要求5所述的球孢白僵菌突变株。