[发明专利]一种鸡蛋常用药物残留检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物检测技术领域，尤其涉及一种鸡蛋常用药物残留检测方法。

背景技术

我国是家禽养殖大国，2005年禽蛋年总产量已达28795万吨，位居世界首位，其中鸡蛋由于营养丰富、易被吸收、口感良好、价格便宜而深受消费者喜爱。鸡蛋占绝大部分禽蛋市场，而90％以上的鸡蛋都是由农户和小企业生产的，尽管目前无公害食品蛋鸡饲养允许使用的治疗药物受到严格限制，但实际生产中，为降低疫病风险，滥用误用抗生素现象十分严重，同时通过环境和食物链的作用致使药物残留问题也日益加剧。药物残留对人体的危害主要有抗生素类药物可引起人类发生不同程度的过敏反应，使细菌产生耐药性，给临床上感染疾病的治疗带来困难；食用药物残留的动物源食品，可导致肠道菌群失调,致病菌大量繁殖，给人类造成危害。由于药物残留危害极大，各国政府对食品安全高残留限量(MRL)和休药期，同时各国都在努力建立重要药物残留检测方法，以监控和尽量减少药物残留的发生。

发明内容

为了防止市场上鸡蛋的常用药物残留危害人体健康，本发明的目的是提供一种鸡蛋常用药物残留的检测方法，防止残留药物超标的鸡蛋进入市场。

一种鸡蛋常用药物残留检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

鸡蛋选择：随机选择1个鸡蛋打碎并在高速食品搅碎机中搅拌均匀；残留药物提取：用电子秤取通过步骤A得到的鸡蛋5g，置于离心管中，加入一定比例的磷酸盐缓冲溶液和乙腈溶液10ml，然后将所得溶液在振荡器中振荡一段时间,再将振荡所得溶液置于离心机中离心一段时间并收集下层提取液，接着将下层提取液用稀释剂稀释至400ml；溶液净化：将SPE固相萃取柱用5ml甲醇，5ml超纯水依次淋洗活化，开启真空泵，控制流速将提取液上柱，过柱完成后，用5ml甲醇，5ml超纯水冲洗萃取柱，继续抽真空10min以除去柱中残留水分，最后，以6ml甲醇洗脱，收集洗脱液并在室温下用N₂吹扫至近干，用甲醇定容至1ml；残留药物检测：以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统,步骤C所得溶液在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图；在本步骤中色谱条件为流动相为乙腈和0.1％甲酸溶液，柱温25℃，流速0.4ml/min；进样量20μl；质谱条件为电喷雾离子源；正离子扫描；雾化气、脱溶剂气、锥孔气为氮气，碰撞气为氩气；源温度和脱溶剂气温度分别为90和350℃；脱溶剂流速和锥孔气流速分别为500和70L/h；毛细管电压为4kV。

作为本发明的进一步改进，所述磷酸盐缓冲溶液和乙腈溶液的比例为1：1～1：5。

作为本发明的进一步改进，所述振荡时间为15～30min。

作为本发明的进一步改进，所述稀释剂为甲醇溶液。

作为本发明的进一步改进，所述离心时间为10～20min。

作为本发明的进一步改进，所述液相色谱所采用的色谱柱粒度为5μm。

作为本发明的进一步改进，所述流速为3～5ml/min。

作为本发明的进一步改进，所述SPE固相萃取柱为OasisHLB。

本发明的有益效果在于：

1、本发明的装置简单、操作方便和适用范围广，可同时检测抗生素类药物残留，磺胺类药物残留，抗球虫药物残留；

2、本发明药物提取采用乙腈相比于采用乙酸乙酯，二氯甲烷有如下优点：乙酸乙酯提取浸出杂质多，且过SPE柱后基质干扰较大；二氯甲烷提取属于中等极性溶剂,有可能提取出脂类物质,因此提取浓缩后需脱去脂类物质，且乙腈的提取效果较好；

3、采用本发明检测准确度高，效果稳定,耗时少，为监控鸡蛋品质和评定无公害鸡蛋提供了有效的检测手段。

为了对本发明有益效果作进一步阐述，本发明人进行了大量运用性试验，特别说明的是，本发明试验旨在说明本发明技术的有益效果，绝不仅限于本发明的范围。

实验1：样品提取液的选择

综合考虑本发明检测的抗生素类药物残留、磺胺类药物残留、抗球虫药物残留的性质，分别用乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈作为提取液，从三者的提取时间，提取效率，带入的杂质多少、是否带入脂类物质等几方面进行比较。

以乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈作为提取液与磷酸盐缓冲溶液一定比例混合，共10ml，然后将所得溶液在振荡器中振荡一段时间,再将振荡所得溶液置于离心机中离心一段时间并收集下层提取液，接着将下层提取液用稀释剂稀释至400ml，用检测器检测。

表1不同提取液对药物残留提取情况比较分析