[发明专利]尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼类远缘杂交育种方法，尤其涉及尖头塘鳢与云斑尖塘鳢不同属间鱼类的杂交育种方法，属于水产动物杂交育种技术领域。

背景技术

尖头塘鳢（Eleotrisoxycephala）隶属于鲈形目（Perciformes）、鰕虎鱼亚目（Gobioidei）、塘鳢科（Eleotridae）、塘鳢属（Eleotris）的鱼类，俗名黑笋壳、什抛、竹壳、黑淋哥，是一种较为名贵的淡水小型经济鱼类。在我国大陆，其主要分布于上海、江苏、浙江、福建、广东、广西、海南等，属于暖水性鱼类。尖头塘鳢个体较小，1龄体重一般15-50克/尾，体重250克以上极为少见，但肉质好，市场价格高，规格150g/尾以上达140元/kg，深受消费者的青睐。但由于生长速度慢，产量低，人工养殖性能差，难以开展规模化养殖生产。因此，如何通过基因改良，提高其生长速度及养殖性能是其产业化、规模化发展的关键所在。

云斑尖塘鳢（Oxyeleotrismarmoratus Bleeker），俗名泰国笋壳鱼（Marble goby），属塘鳢科（Eleotridae）、尖塘鳢属（Oxyeleotris），我国自上1986年从东南亚引种以来，现已成为我国珠三角地区的重要淡水养殖对象。其体型大、生长速度快，适宜条件下1龄体重可达500g/尾，是热带、亚热带地区的优质暖水性鱼类。目前未见有关于尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种的方法。

发明内容

本发明的目的是提供尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

尖头塘鳢与云斑尖塘鳢杂交育种方法，包括以下步骤：

1）亲鱼的选择

选择1龄以上、体重50~150g、并处于性腺发育成熟期的尖头塘鳢和2~3龄、体重500g以上、并处于性腺发育成熟期的云斑尖塘鳢作为杂交繁育亲本；

2）亲鱼的强化培育

尖头塘鳢与云斑尖塘鳢亲鱼分池培育，每万尾亲鱼一次性投放活饲料鱼3000～4000kg，之后每15d每万尾亲鱼补充1500～2000kg活饲料鱼；或者投喂冰鲜鱼浆和人工饲料，同时添加维生素与矿物质，每日投喂两次，日投饲量为亲鱼重量的8～12%，投喂量上午占1/3，下午占2/3；

3）亲鱼的雌雄鉴别与性比

进入繁殖季节，鉴别亲鱼的性别，雌鱼腹部膨大，卵巢轮廓明显，生殖突末端圆钝呈扇形、淡红色，生殖孔两侧隆起、无黑色素点；雄鱼体色深，腹部膨大不明显，生殖突末端尖细呈三角形、白色，泄殖孔周边有黑色素点，挤压腹部有乳白色精液流出；挑选尖头塘鳢为母本，云斑尖塘鳢为父本，两者雌雄配对为2~3：1；

4）人工催产与受精

人工催产采用一针注射法，尖头塘鳢雌鱼注射促黄体素释放激素类似物2号和马来酸地欧酮，云斑尖塘鳢雄鱼注射人绒毛膜促性腺性激素，在水温28～30℃时48～54h达效应时间；

人工催产达到效应时间后，挤压卵巢，取出批量卵子，放于盛有生理盐水的鱼碟上，然后通过挤压精巢，加入精液，并用鸡毛搅拌或抖动鱼碟，使受精均匀，之后均匀倒于盛有淡水的20cm*30cm的40目网片上，每张网片10000~15000粒受精卵，受精过程5min内完成；

5）受精卵的孵化

受精卵附着网片后，用孵化用水清洗2~3遍，将网片浸泡于高锰酸钾溶液中消毒2~3min，消毒后将其悬挂在孵化池中，孵化过程保持充气，孵化池水温25~30℃，溶解氧大于5mg/L，pH值7.5~8.5；经过35~40h孵化出膜，再经45~50h卵黄囊消失，开始平游，进入鱼苗培育期；

6）1.2cm鱼苗培育

鱼苗培育阶段在孵化池或移到培育池中进行，培育池面积2m*4m，水深1.0~1.2m，每平方放入仔鱼20~30万尾；平游后仔鱼12~24h内开口摄食，每日早晚各投喂S型臂尾轮虫1次，投喂密度40~50个/mL；开口后第5~7d，投喂L型臂尾轮虫、枝角类和桡足类幼体；每天排污和换水1次，每次换水1/5；苗种出膜后，经培育10~15d，仔鱼生长至1.0~1.5cm，分疏转入3.0cm鱼苗培育阶段；

7）3cm规格鱼苗培育