[发明专利]一种预测家禽种蛋受精率的方法

权利要求书

1.一种预测家禽种蛋受精率的方法，其特征在于：这种预测家禽种蛋受精率的方法：

(1)将公鸡的精液混合稀释，每只母鸡人工输入0.05ml精液，人工输精48小时后开始收集种蛋；轻轻打开种蛋蛋壳的钝端，将蛋内容物轻轻倒出，避免将卵子划破；利用蛋黄分离器分开卵子和卵清蛋白；

(2)在盛有质量百分比浓度为1％NaCl溶液的烧杯中，浸泡卵子3分钟，除去多余的卵清蛋白；

(3)转移步骤(2)处理后的卵子到一个培养皿中，用手轻轻转动卵子使胚盘区域正好朝上放置，用解剖针在非胚盘区域偏下穿刺，形成几个小洞，降低内部卵黄压力；

(4)用小剪刀，沿胚盘周围距离胚盘边缘至少1cm的区域将该部分卵黄膜切下，在质量百分比浓度为1％NaCl溶液中清洗干净，除去全部卵黄后得到卵黄膜；

(5)将步骤(4)分离得到的卵黄膜放置在载玻片上，滴入数滴1％NaCl，用解剖针轻轻将卵黄膜展平，避免形成皱褶；在载玻片上滴入质量百分比浓度为3％的多聚甲醛，用盖玻片封闭；

(6)用吸管吸走NaCl液体，滴入3～5滴20％福尔马林溶液；

(7)10-20秒后，用吸管吸走福尔马林溶液，加入几滴Schiffs溶液，使卵黄膜充分染色，控制染色时间，以免染色太深，影响观察；

(8)在卵黄膜上加上盖玻片，在100倍光学显微镜下观察经过精卵互作之后形成的微孔数量，微孔直径为10～30ul；统计每个卵黄膜上胚盘区域1.35mm²面积内微孔数量；

(9)重量步骤(1)-(8)，对每批次的种蛋逐个统计每个卵黄膜上胚盘区域1.35mm²面积内微孔数量，来预测本批次种蛋受精情况；若种蛋卵黄膜上微孔数平均为5，则种蛋的受精率为70％左右；若微孔数低于0.5，则种蛋受精率接近于零；

所述的步骤(9)中，卵黄膜上的微孔数和种蛋受精率的回归曲线方程如下：

y＝0.0281x³-1.0434x²+13.813x+23.884

其中，y是种蛋受精率，x是种蛋卵黄膜上的微孔数，该回归曲线的R²＝0.98。