[发明专利]一种谷胱甘肽微球的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及谷胱甘肽，尤其是涉及一种谷胱甘肽微球的制备方法。

背景技术

谷胱甘肽(GSH)属于含有巯基的小分子活性肽，广泛分布于机体中，是细胞内非蛋白硫氢基团主要的组成部分，在生物体内有着多种重要的生理功能，对于维持生物体内适宜的氧化还原环境起着至关重要的作用，具有延缓衰老、抗疲劳等作用，但是GSH极易被氧化，使其生理保健作用效果降低，微胶囊化GSH可以克服不同成分间的反应且可以对其起到保护作用，极大地保持谷胱甘肽的生理特性，提高其稳定性。

水凝胶体系是目前提高蛋白质以及多肽类药物体内稳定性以及实现肠道靶向释放的重要方法。水凝胶是一类具有亲水基团，能被水溶胀但不溶于水的具有三维网络结构的聚合物，能够感知外界刺激的微小变化，如温度、pH值、离子强度、电场、磁场等，通过体积的溶胀或收缩对刺激做出敏感性的相应。水凝胶的这一特点使它在生物医学领域、生物酶的固定等方面有广泛的应用前景。目前在蛋白质和多肽靶向输送中应用得最多的是pH敏感性水凝胶。壳聚糖-海藻酸钠水凝胶体系已被广泛用于蛋白质和多肽类药物的肠道靶向释放。

SPG膜乳化法主要用于制备尺寸均一的乳液、乳珠、微球、微胶囊等，可用于制备W/O、O/W、W/O/W、O/W/O不同乳液，实现乳液的尺寸均一性和可控性、微球表面功能的可控性和稳定性、多孔微球结构的可控性和稳定性；实现均一乳液大规模制备的可行性；多孔微球或缓释胶囊粒径的可控性等。SPG膜乳化法制备的微球，粒径范围为2～100μm，在各个领域都有广泛应用，在生物工程领域可以作为活性物质的分离介质，在药学领域可以作为控制药物释放的载体，在摄影领域可以作为固液态的调色剂等。其中药学和食品是膜乳化应用最广泛的领域，通过不同的制备方式将水溶性的抗癌药物包埋制备成微球或微囊，提高生物利用率，均一的乳液还可以有效保持食品风味和良好口感，掩盖住个别食品的刺激性气味等。

发明内容

本发明的目的是提供一种谷胱甘肽微球的制备方法。

本发明包括以下步骤：

1)将GSH溶解在SAL溶液中作为水相；油相为液体石蜡和石油醚混合物，所述混合物中含乳化剂，将烘干的SPG膜放入油相中超声，安装到SPG膜乳化器中，在氮气压力下水相通过SPG膜，进入到油相中，得SAL乳状液；

2)将CaCl₂溶液与步骤1)中的油相混合，搅拌超声后形成乳状液，再与步骤1)得到的SAL乳状液混合，搅拌后，得乳白色乳状液，再离心，除去上清液，清洗，再除去上清液后，得到海藻酸钠-钙微球，抽滤清洗，除去微球表面的有机溶剂，然后将微球分散到O-CMC溶液中，得负载GSH的O-CMC-SAL微球，再抽滤，除去表面残留的O-CMC，干燥后即得谷胱甘肽微球。

在步骤1)中，所述SAL溶液可采用体积百分比为1.5％，pH为4.2的SAL溶液；所述油相中液体石蜡与石油醚的体积比可为7:5；所述乳化剂可采用PO-500乳化剂，所述乳化剂的含量按质量百分比可为液体石蜡和石油醚混合物的4％；所述超声的时间可为30min；所述SPG膜的孔径可为20μm；所制得的SAL乳状液为W/O型SAL乳状液，在SAL乳状液中水相与油相的体积比可为1∶10。

在步骤2)中，所述CaCl₂溶液可采用体积百分比为2％，pH为6的CaCl₂溶液；所述CaCl₂溶液与油相的体积比可为1∶1；所述搅拌的条件可为300rmp下搅拌5h；所述清洗可采用石油醚离心清洗2次，离心的条件可为8000rmp下离心5min，20℃；所述抽滤清洗可采用去离子水抽滤清洗；所述O-CMC溶液的体积百分比浓度可为0.5％；所述再抽滤可采用去离子水抽滤；所述干燥可采用真空冷冻干燥24h。

本发明以海藻酸钠(sodium alginate,SAL)和羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,O-CMC)为壁材，以CaCl₂为交联剂,采用SPG膜乳化法制备谷胱甘肽微球，并对微球的形态结构及稳定性进行分析。

附图说明

图1为谷胱甘肽微球扫描电镜图。

图2为空微球、SGH微球的红外光谱图。

图3为微球的差示量热扫描图。

图4为GSH微球及空微球的热重分析图。

具体实施方式

以下实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。

1.谷胱甘肽微球的制备