[发明专利]一种辣椒花药培养直接成苗的方法在审
申请号: | 201510479251.7 | 申请日: | 2015-08-03 |
公开(公告)号: | CN105028205A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 张菊平;张会灵;高文;吴正景;徐珊珊 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 罗民健 |
地址: | 471000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辣椒 花药培养 直接 方法 | ||
1.一种辣椒花药培养直接成苗方法,选取杂交一代辣椒品种,在开花盛期选取处于单核靠边期的花蕾,并装入自封袋中置于4℃环境中1~3d,然后对花蕾进行消毒并剥取花药,将所获得花药接种于培养基中进行花药培养形成胚状体,所述培养基是通过在基本培养基中添加外源物质所制得的,其特征在于:所述的培养基制作和花药接种、培养方法,并且,经花药培养出现胚状体之后,再进行胚状体培养,最终使其形成根叶芽俱全的再生植株;
其中,所述培养基的制作方法为:分别选择MS培养基和SNGM培养基作为两种基本培养基,其中以MS培养基为基本培养基制得M培养基,以SNGM培养基为基本培养基制得S培养基,M培养基和S培养基中添加的外源物质相同,均为各自培养基重量3%的麦芽糖、0.8%的琼脂、0.25%的活性炭、4mg/L的NAA以及1~2mg/L的6-BA,并且,M培养基和S培养基的pH均为6.0,再将M培养基和S培养基于121℃、1.1MPa条件下灭菌20min后,冷却至60~70℃,对M培养基和S培养基分别进行分装,每100mL三角瓶中倒入30mL的M培养基或S培养基;
所述的花药接种与培养的方法为:
(1)花药接种:将所获得的花药接种在盛有M培养基的三角瓶中,每瓶接种5~6枚花药,将三角瓶封口;
(2)花药培养:将上述接种后的三角瓶放在35℃的培养箱中暗培养,7d后,再将其进行光照培养,光照强度为2500Lx,温度为25℃,待三角瓶中的花药膨大后,将膨大的花药转接于S培养基中,然后置于25℃培养室中进行暗培养,至胚状体出现;
所述的胚状体培养方法为:对花药培养所产生的胚状体再进行弱光照培养,光照强度为2000Lx,每天光照10h,直至形成根叶芽俱全的再生植株。
2.根据权利要求1所述的一种辣椒花药培养直接成苗方法,其特征在于:在选取单核靠边期花蕾时,每隔3~4d摘除已开放的花朵,让植株始终处于开花状态。
3.根据权利要求1所述的一种辣椒花药培养直接成苗方法,其特征在于:对所得花蕾进行消毒的方法为:先用流水冲洗花蕾30min,再用体积分数70%的酒精对花蕾表面消毒30s,之后用体积分数5%的次氯酸钠消毒12~15min,然后用无菌水冲洗4次,每次5min。
4.根据权利要求1所述的一种辣椒花药培养直接成苗方法,其特征在于:剥取花药的方法为:在超净工作台上,在铺有无菌滤纸的消毒培养皿中用消过毒的镊子剥取花药,避免损伤、损坏花药,并把花丝去除干净。
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