[发明专利]用于检测呼吸道病毒的试剂盒及其应用有效
申请号: | 201510479372.1 | 申请日: | 2015-08-03 |
公开(公告)号: | CN105018488B | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
发明(设计)人: | 张岩;盖伟;邢婉丽;马桂红;程京 | 申请(专利权)人: | 博奥生物集团有限公司;清华大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅,张立娜 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 呼吸道 病毒 试剂盒 及其 应用 | ||
1.用于检测呼吸道病毒的试剂盒,含有成套单链DNA;所述成套单链DNA由探针组和引物对组组成;
所述引物对组由如下4个引物对组成:由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成的引物对1;由序列表中序列3和序列4所示的两条单链DNA分子组成的引物对2;由序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA分子组成的引物对3;由序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA分子组成的引物对4;
所述探针组由如下4个单链DNA探针组成:序列表中序列9所示的单链DNA探针1;序列表中序列10所示的单链DNA探针2;序列表中序列11所示的单链DNA探针3;序列表中序列12所示的单链DNA探针4;
所述探针组中的每条单链DNA探针的5’端均标记有荧光报告基团FAM,3’端均标记有荧光淬灭基团TAMRA;
所述试剂盒还含有内对照引物对和内对照探针;所述内对照引物对由序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA分子组成;所述内对照探针为序列表中序列15所示的单链DNA探针;所述内对照探针的5’端标记有荧光报告基团FAM,3’端标记有荧光淬灭基团TAMRA;
所述试剂盒中还含有碟式芯片;
所述碟式芯片的1#至6#反应腔分别存放干燥的如下(1)-(6):
(1)所述引物对1和所述单链DNA探针1;
(2)所述引物对2和所述单链DNA探针2;
(3)所述引物对3和所述单链DNA探针3;
(4)所述引物对4和所述单链DNA探针4;
(5)所述内对照引物对和所述的内对照探针;
(6)阴性对照品;
所述碟式芯片为24反应腔碟式芯片。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中还含有恒温扩增缓冲液和恒温扩增酶溶液;
所述恒温扩增缓冲液的溶剂为水,溶质及浓度如下:200mM pH 8.0的Tris-HCL, 50mM DTT,10mM dNTP,10mM rNTP,80mM MgCl2,450mM KCl,15%体积百分含量DMSO,1M 山梨醇,20mM 四甲基氯化铵;
所述恒温扩增酶溶液的溶剂为水,溶质及浓度如下:AMV逆转录酶 1U/μl,T7 RNA 聚合酶 5U/μl,核糖核酸酶H 0.5U/μl,焦磷酸酶0.5U/μl,RNA酶抑制剂 5U/μl,BSA 0.5μg/μl。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:所述呼吸道病毒为如下中的至少一种:呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒和人偏肺病毒。
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