[发明专利]一种蚯蚓抗损伤制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白质生物技术领域，特别是涉及一种蛋白质药物制剂。

背景技术

蚯蚓俗称地龙，作为一种中药材，具有很高的药用价值，在我国的应用已经有几千年历史。据《本草纲目》记载:蚯蚓能治疗瘰疬溃烂、口舌糜疮，临床上常用来治疗骨折、创伤、下肢溃烂等疾病。蚯蚓中含高度不饱和脂肪酸、核苷酸、酶类、蛋白质、蚯蚓解热碱等多种物质，具有清热定惊、止咳平喘、活血通络、降压、抗溃疡、抗肝纤维化、利尿等功能。此外，现代分离技术发现，蚯蚓中还含有纤溶酶、抗菌肽、多种抗氧化酶等活性成分，因此具有止血镇痛、促进创伤愈合、抗氧化、抗血栓、调节免疫、抗心律失常、抗癌等作用。近几年蚯蚓药用价值越来越受到重视，临床研究和应用也日益广泛。蚯蚓不仅在临床中用于药物治疗，而且在动物营养饲料、土壤改良、环境治污、保护生态环境、物质循环以及维持自然界生态平衡等方面发挥着特殊作用。

目前，治疗创伤的药物主要以化学合成药和中药内服和中药外敷为主。化学合成药对用药者易产生药物的依赖性和耐药性，存在长期残留在动物和人体内的弊端，人们经常食用药物残留的动物肉质，都会带来对身体潜在的伤害，从而引发不可逆转的后果。中药一般由多种药物组成，成分复杂，内服或外敷使用均存在药理作用不明、药效欠佳、药效存在不可控性、煎煮麻烦以及携带不便等问题。

发明内容

为解决上述存在的问题，本发明的目的在于提供一种药效明显、使用方便、安全可靠、无毒副作用的蚯蚓抗损伤制剂及其制备方法。

为实现上述发明目的，本发明提供一种蚯蚓抗损伤制剂，该制剂的配方按体积比为：蚯蚓有效成分85%，1-2丙二醇10%，吐温-803～4%，0.3mol/L蔗糖和甘油以及NaCl1～2%。

优选地，所述蚯蚓有效成分按照以下步骤制备：（1）取鲜蚯蚓进行清洗，隔夜吐净泥沙，次日清水反复清洗干净；（2）取等体积缓冲液与蚯蚓进行组织研磨，研磨时保证操作处于4℃环境；（3）研磨后组织液在冰浴中进行细胞的超声破碎；（4）冷冻离心三次，弃沉淀得到蚯蚓粗提物；（5）使用30kD和100kD的超滤管进行超滤处理。

优选地，所述的鲜蚯蚓为太平二号蚯蚓。

优选地，该制剂按配方混合后进行过滤除菌再投入使用。

优选地，所述蚯蚓有效成分的分子量为30-100kD。

优选地，该制剂为液状，给药方式为喷涂。

优选地，所述组织研磨在冰水环境下进行，蚯蚓有效成分的整个制备过程在4℃环境下进行，从而防止酶变性。

优选地，所述组织研磨的具体操作为：将4℃、0.2mol/L、pH=7.2的现配PBS缓冲液与蚯蚓等体积混合置于组织研磨器中研磨。

优选地，所述离心条件为4℃、12000r/min离心10min，且重复离心三次。

优选地，该制剂具有创伤愈合作用，用于制备抗损伤药物。

优选地，该制剂具有抑菌作用。

本发明还提供一种蚯蚓抗损伤制剂的制备方法，包括以下步骤：

取鲜蚯蚓进行清洗，隔夜吐净泥沙，次日清水反复清洗干净；

取等体积缓冲液与蚯蚓进行组织研磨，研磨时保证操作处于4℃环境；

研磨后组织液在冰浴中进行细胞的超声破碎；

冷冻离心三次，弃沉淀得到蚯蚓粗提物；

使用30kD和100kD的超滤管进行超滤处理得到蚯蚓有效成分；

按配方蚯蚓有效成分85%，1-2丙二醇10%，吐温-803～4%，0.3mol/L蔗糖和甘油以及NaCl1～2%混合。

优选地，所述的鲜蚯蚓为太平二号蚯蚓。

本发明提供的一种蚯蚓抗损伤制剂所产生的有益效果如下：（1）该制剂经科学方法制取，保证了动物和人体复杂生命系统以及复杂疾病防治的客观要求，具有多肽类药物的优点，如具有明显的创伤愈合作用，是一种疗效可靠、毒副作用小、无环境污染的制剂；（2）该制剂属于蛋白类药物制剂，药效高，副作用低,不蓄积中毒，因为蛋白质类药物本身是人体内源性物质或针对生物体内调控因子研发而得，通过参与、介入、促进或抑制人体内或细菌病毒中生理生化过程而发挥作用，副作用低，药效高，针对性强，不会蓄积于体内而引起中毒；（3）本发明可以带动蚯蚓养殖业及其附属产业的发展，改善日益恶化的环境，为社会提供大量的就业岗位，缓解当下的就业压力，增加当地政府的税收收入。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明。